CHO細胞においてα₁アドレナリン受容体刺激によって引き起こされる2相性の酸排出反応

抄録

細胞外の微少なpH変化を検出できるマイクロフィジオメーターを用い，ヒトα_1aアドレナリン受容体を発現させたCHO細胞において，ノルアドレナリン刺激による細胞からの酸排出反応を解析した。時間軸に沿って2つのピークが認められ，1つ目は刺激後10秒程度で極大に達する早い相で，2つ目は2分後にプラトーに達する遅い相であった。いずれの相もノルアドレナリンの濃度に依存して増大したが，pEC50値は，6.0及び6.6と早い相で低値を示した。どちらの相もアミロライドやその類似体でほとんど抑制され，Na/H交換体を介した反応であると考えられた。これらの酸排出反応におけるCaの関与を検討したところ，BAPTA/EGTA処置によって早い相はほぼ完全に抑制されたが，遅い相はあまり影響を受けなかった。早い相におけるCa依存性についてCaチャネル阻害薬を用いてさらに検討したところ，抑制効果はEGTA，Ni，LOE908で認められ，nifedipine，verapamil，SKF96365，conotoxinGIVAはほとんど効果がなかった。ノルアドレナリンの反復刺激で阻害薬の抑制効果は増強し，α₁アドレナリン受容体刺激時における酸排出反応の早い相には，細胞内の貯留Caと受容体作動性Caチャネルが関与していることが示唆された。