MALDI Biotyperにおける生化学的性状検査を用いたKlebsiella oxytocaとRaoultella spp.の同定能の評価

金武 司; 塚本 英範; 庄司 晴香; 高橋 聡充; 星 翼; 大橋 さと子; 中野 勝彦

doi:10.14932/jamt.20-26

Abstract

近年，マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析法（MALDI-TOF MS）の普及により菌種同定が短時間で可能となった。しかしながら，MALDI-TOF MSではKlebsiella oxytocaとRaoultella spp.はマススペクトルが非常に類似しているため鑑別は困難とされている。そこで今回，MALDI Biotyper（ブルカー・ダルトニクス）におけるK. oxytocaおよびRaoultella spp.の同定能を生化学的性状検査を用いて検討した。当院臨床検体から分離され，MALDI BiotyperでScore Value 2.0以上かつScore Rank 1位の菌名にK. oxytocaもしくはRaoultella spp.が候補として挙げられた124株およびATCC標準菌株2株を対象とした。生化学的性状検査とMALDI Biotyperによる同定結果を比較すると，K. oxytocaは菌種レベルで100%一致し，Raoultella spp.も属レベルで100%一致したが，菌種レベルの一致率は23.5%（8/34）であった。Raoultella spp.の菌種レベルの同定には生化学的性状検査などの追加試験が必要である。

Translated Abstract

Although matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) has proven its high accuracy and rapidity for microorganism identification, the differentiation between Klebsiella oxytoca and Raoultella spp. by MALDI-TOF MS is difficult because of their highly similar mass spectra. Thus, the aim of this study was to evaluate the capability of MALDI Biotyper (Bruker Daltonics) to identify K. oxytoca and Raoultella spp. using biochemical tests. We tested a collection of 124 clinical isolates previously identified as K. oxytoca or Raoultella spp. by MALDI Biotyper and two ATCC strains. MALDI Biotyper correctly identified 100% of K. oxytoca isolates to the species level. For Raoultella spp., 100% of their isolates were identified to the genus level and only 8 (23.5%) isolates were identified to the species level. The use of additional phenotypic tests is recommended for the reliable identification of this genus.

I　はじめに

Raoultella属は腸内細菌科に含まれるグラム陰性桿菌である。Raoultella ornithinolytica，Raoultella planticola，Raoultella terrigenaはかつてKlebsiella属に分類されていたが，16S rRNA遺伝子およびrpoB遺伝子のシーケンス解析により，Raoultella属に再分類された¹⁾。Raoultella属はこれまでに菌血症^2)～4)や尿路感染症^4),5)など様々な臨床検体からの分離が報告されており，本邦ではR. ornithinolyticaとR. planticolaによる菌血症例が報告されている^6),7)。

近年，マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析法（MALDI-TOF MS）の普及により，正確な菌種同定が短時間で可能となったが，MALDI Biotyper（ブルカー・ダルトニクス）ではKlebsiella oxytocaとRaoultella spp.はマススペクトルが非常に類似しているため鑑別は困難とされている。

そこで今回，MALDI BiotyperにおけるK. oxytocaおよびR. ornithinolytica，R. planticola，R. terrigenaの同定能を炭素同化試験，インドール産生試験およびオルニチン脱炭酸試験の生化学的性状検査を用いて検討したので報告する。

II　対象と方法

1．対象

2019年1月から9月までに当院臨床検体から分離され，MALDI BiotyperでScore Value 2.0以上かつScore Rank 1位（以下：ベストマッチ）の菌名にK. oxytocaもしくはRaoultella spp.が候補として挙げられた124株と，K. oxytoca（ATCC 13182），R. terrigena（ATCC 33257）を対象とした。臨床検体の材料内訳は，喀痰36株，尿36株，糞便24株，血液16株，創部4株，咽頭粘液3株，その他5株であった。

2．生化学的性状検査

1）炭素同化試験

Monnetら⁸⁾の報告による方法で実施した。炭素基質は各文献^8)～13)を参照し，エタノールアミン塩酸塩（シグマアルドリッチ），ヒスタミン二塩酸塩（シグマアルドリッチ），D-(+)-メレジトース水和物（シグマアルドリッチ），3-ヒドロキシ安息香酸（シグマアルドリッチ）を使用した。10 g/Lのエタノールアミン水溶液，10 g/Lのヒスタミン水溶液，10 g/Lの3-ヒドロキシ安息香酸水溶液，20 g/LのD-メレジトース水溶液を調整し，0.22 μm濾過滅菌フィルター（メルク）で濾過滅菌後，これを炭素基質液とした。対象菌株1株につき滅菌スピッツを5本用意し，5本全てにAUXメディウム（ビオメリュー）を200 μL加え，4本には各炭素基質溶液を50 μL加え，残り1本は炭素基質液を加えず陰性対象とした。5%羊血液寒天培地（栄研化学）で純培養（24時間，35℃）した菌コロニーから滅菌生理食塩水（ベクトン・ディッキンソン）に対象菌株の菌液をMcFarland No. 0.5に調整し，5本全てに100 μLずつ分注した。30℃で48時間培養後，目視で陰性対象との発育を比較し，混濁が認められた基質を炭素同化試験陽性とした。

2）インドール産生試験，オルニチン脱炭酸試験

5%羊血液寒天培地（栄研化学）で純培養（24時間，35℃）した菌コロニーより，ポアメディアOIML培地（栄研化学）を使用し，添付文書に従って実施および判定した。

3）生化学的性状検査による鑑別性状

K. oxytocaおよびRaoultella spp.の生化学的性状検査による鑑別性状をTable 1に示す。鑑別性状は各文献^10)～15)を参照し作成した。

Table 1 Biochemical test features for differentiation of Klebsiella oxytoca and Raoultella spp.

Bacterial species	Biochemical test*
	Assimilation tests				Indole production	Ornithine decarboxylase
	Ethanolamine	Histamine	D-Melezitose	3-Hydroxybenzoate	Indole production	Ornithine decarboxylase
K. oxytoca	+	−	v	+	+	−
R. ornithinolytica	−	+	−	−	+	+
R. planticola	−	+	−	−	v	−
R. terrigena	−	+	+	+	−	−

*+: positive reaction, −: negative reaction, v: variable reactions

3． MALDI Biotyperによる同定

対象菌株を5%羊血液寒天培地（栄研化学）へ純培養（24時間，35℃）し，セルスメア法にて測定を行った。セルスメア法はコロニーをターゲットプレートに塗布後，HCCA portioned（ブルカー・ダルトニクス）を1 μL滴下し，乾燥後測定した。MALDI Biotyperによるマススペクトルの取得はflex control 3.4で測定し，MALDI Biotyper Compass 4.1およびMALDI Biotyper Compass Explorer 4.1を用いて菌種同定を行った。

III　結果

1．生化学的性状検査による同定

生化学的性状検査による同定では対象菌株126株はK. oxytoca 92株（K. oxytoca ATCC 13182含む），R. ornithinolytica 4株，R. planticola 25株，R. terrigena 2株（R. terrigena ATCC 33257含む）と同定されたが，3株は炭素同化試験ですべての基質が陰性となり，同定に至らなかった。

2． MALDI Biotyperによる測定結果

1）生化学的性状検査でK. oxytocaと同定された菌株

生化学的性状検査による同定でK. oxytocaと同定された92株のMALDI Biotyperでの測定結果をTable 2に示す。生化学的性状検査でK. oxytocaと同定された92株中85株はScore Value 2.0以上のRaoultella spp.がScore Rank 2位から9位までのいずれかに菌名候補として挙げられたが，ベストマッチの菌名候補には全株K. oxytocaが挙げられ，生化学的性状検査同定結果とベストマッチの菌名候補は菌種レベルで100%一致した。

Table 2 Results of MALDI Biotyper identification for 92 isolates that were identified as Klebsiella oxytoca by biochemical tests

Score Rank	The highest score rank respectively				Median Scores (min–max)
	Klebsiella oxytoca		Raoultella spp.*		Klebsiella oxytoca	Raoultella spp.
	≥ 2.0	≤ 1.99	≥ 2.0	≤ 1.99	Klebsiella oxytoca	Raoultella spp.
1	92				2.41 (2.27–2.59)
2			2			2.21 (2.19–2.23)
3			3			2.21 (2.18–2.28)
4			16			2.19 (2.10–2.32)
5			29	1		2.12 (1.89–2.21)
6			20	1		2.08 (1.98–2.29)
7			8	2		2.07 (1.97–2.16)
8			6	2		2.04 (1.93–2.08)
9			1	1		2.03 (2.01–2.05)
10
Total	92	0	85	7

*Raoultella spp. includes Raoultella ornithinolytica, Raoultella planticola, and Raoultella terrigena.

2）生化学的性状検査でRaoultella spp.と同定，もしくは同定不能となった菌株

生化学的性状検査による同定でRaoultella spp.と同定された31株，同定不能となった3株のMALDI Biotyperでの同定結果をTable 3に示す。34株すべてScore Rank 1位から10位までにScore Value 2.0以上のRaoultella spp.が菌名候補として挙げられ，Raoultella spp.以外の菌名候補は挙げられなかった。

Table 3 Results of MALDI Biotyper identification for 34 isolates that were identified as Raoultella spp. and not identification by biochemical tests

Strain No.	MALDI Biotyper Score rank and Score value*											Score value difference between RSPP-KO (%)	Biochemical identification
Strain No.	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	KO Score Value**	Score value difference between RSPP-KO (%)	Biochemical identification
1	2.62	2.54	2.47	2.46	2.46	2.43	2.42	2.42	2.41	2.35	2.07	20.9	RP
2	2.52	2.51	2.45	2.44	2.37	2.33	2.33	2.30	2.27	2.25	2.00	20.3	RP
3	2.60	2.52	2.49	2.44	2.43	2.40	2.37	2.37	2.36	2.31	2.17	16.5	RP
4	2.50	2.47	2.44	2.37	2.34	2.32	2.30	2.30	2.25	2.23	2.14	14.4	RP
5	2.58	2.49	2.44	2.43	2.42	2.39	2.38	2.36	2.32	2.31	2.11	18.2	RO
6	2.61	2.48	2.45	2.45	2.41	2.38	2.36	2.35	2.33	2.33	2.03	22.2	RP
7	2.60	2.54	2.42	2.41	2.41	2.39	2.38	2.37	2.37	2.35	2.09	19.4	RP
8	2.64	2.46	2.45	2.44	2.44	2.42	2.41	2.41	2.38	2.33	2.11	20.0	RP
9	2.27	2.24	2.16	2.13	2.11	2.09	2.09	2.08	2.06	2.06	1.99	12.3	RT
10	2.63	2.49	2.47	2.46	2.46	2.46	2.42	2.39	2.39	2.38	2.14	18.6	RP
11	2.62	2.51	2.47	2.45	2.43	2.43	2.42	2.40	2.38	2.38	2.12	19.0	RP
12	2.62	2.53	2.48	2.47	2.46	2.42	2.41	2.40	2.40	2.39	2.05	21.7	RP
13	2.54	2.50	2.44	2.43	2.39	2.39	2.38	2.32	2.30	2.28	2.08	18.1	RP
14	2.61	2.55	2.45	2.43	2.42	2.42	2.42	2.39	2.39	2.38	2.06	21.0	RO
15	2.56	2.54	2.53	2.52	2.50	2.48	2.44	2.40	2.40	2.38	2.13	16.7	RP
16	2.63	2.44	2.39	2.39	2.37	2.36	2.34	2.30	2.29	2.26	2.02	23.1	RP
17	2.61	2.60	2.49	2.47	2.46	2.45	2.44	2.44	2.43	2.43	2.01	22.9	RP
18	2.57	2.56	2.49	2.48	2.48	2.44	2.41	2.41	2.39	2.39	2.13	17.1	RP
19	2.57	2.50	2.49	2.44	2.43	2.42	2.37	2.37	2.36	2.35	2.12	17.5	RP
20	2.56	2.49	2.41	2.40	2.38	2.35	2.31	2.31	2.29	2.28	2.07	19.1	RP
21	2.61	2.55	2.48	2.48	2.46	2.46	2.44	2.42	2.41	2.36	2.05	21.4	RP
22	2.58	2.56	2.54	2.48	2.46	2.45	2.44	2.42	2.34	2.33	2.18	15.5	NI
23	2.39	2.32	2.19	2.19	2.16	2.15	2.15	2.13	2.13	2.12	2.02	15.4	RP
24	2.55	2.53	2.52	2.51	2.47	2.47	2.38	2.36	2.35	2.31	2.19	14.1	NI
25	2.37	2.35	2.32	2.25	2.23	2.21	2.20	2.19	2.19	2.18	2.01	15.1	NI
26	2.66	2.56	2.52	2.51	2.44	2.44	2.42	2.41	2.41	2.40	2.03	23.6	RP
27	2.55	2.50	2.48	2.44	2.44	2.41	2.40	2.39	2.38	2.32	1.99	21.9	RO
28	2.64	2.55	2.50	2.46	2.46	2.44	2.43	2.36	2.34	2.34	2.02	23.4	RP
29	2.63	2.58	2.50	2.48	2.48	2.47	2.45	2.45	2.43	2.41	2.03	22.8	RP
30	2.62	2.59	2.50	2.49	2.48	2.47	2.43	2.41	2.40	2.37	1.88	28.2	RP
31	2.31	2.13	2.12	2.11	2.10	2.09	2.08	2.08	2.06	2.06	1.98	14.2	RO
32	2.56	2.54	2.51	2.50	2.49	2.48	2.44	2.41	2.39	2.38	1.98	22.6	RP
33	2.66	2.62	2.50	2.49	2.49	2.47	2.45	2.41	2.39	2.36	1.90	28.5	RP
RT ATCC 33257	2.37	2.35	2.28	2.20	2.20	2.17	2.15	2.14	2.14	2.13	2.00	15.6	RT

KO: Klebsiella oxytoca, RO: Raoultella ornithinolytica, RP: Raoultella planticola, RT: Raoultella terrigena, RSPP: Raoultella spp., NI: Not identification

*White cell: Raoultella ornithinolytica, Green cell: Raoultella planticola, Orange cell: Raoultella terrigena

**Klebsiella oxytoca Score value was measured by removing the Raoultella spp. reference libraries mass spectrum (13 strains of Raoultella ornithinolytica, 6 strains of Raoultella planticola, 5 strains of Raoultella terrigena) by using MALDI Biotyper Explorer 4.1.

MALDI Biotyperでベストマッチの菌名候補にR. ornithinolyticaが挙げられた29株の内，生化学的性状検査でR. ornithinolyticaと同定された菌株は4株（13.8%）であった。4株中1株はScore Rank 1位から10位までのすべてにScore Value 2.0以上のR. ornithinolyticaが候補として挙げられた。

生化学的性状検査でR. planticolaと同定された25株中，MALDI Biotyperにてベストマッチの菌名候補にR. planticolaが挙げられたのは4株であり，生化学的性状検査同定結果と菌種レベルでは16%の一致率となった。残りの21株はベストマッチの菌名候補にR. ornithinolyticaが挙げられ，この内13株はScore Rank 1位から10位までのすべてにScore Value 2.0以上のR. ornithinolyticaが候補として挙げられた。

生化学的性状検査でR. terrigenaと同定された2株はMALDI Biotyperにてベストマッチの菌名候補にR. ornithinolyticaが挙げられ，生化学的性状検査同定結果とベストマッチの菌名候補は菌種レベルでは一致しなかった。しかし，臨床分離株はScore Rank 8位にScore Value 2.0以上のR. terrigenaが候補として挙げられ，R. terrigena（ATCC 33257）はScore Rank 2位から5位までにScore Value 2.0以上のR. terrigenaが候補として挙げられた。

生化学的性状検査で同定不能となった3株はベストマッチにR. ornithinolyticaが2株，R. planticolaが1株候補として挙げられた。

さらに，Table 3にはベストマッチのRaoultella spp.のScore Valueと次候補の最も高いK. oxytocaのScore Valueの差を示し，Score Valueの差は12.3%～28.5%となった。本検討ではScore Rank 1位から10位までにScore Value 2.0以上のRaoultella spp.が菌名候補として挙げられ，K. oxytocaのScore Valueが不明であったため，MALDI Biotyper Compass Explorer 4.1でRaoultella spp.の登録リファレンスライブラリ（R. ornithinolytica 13株，R. planticola 6株，R. terrigena 5株）を除外して再測定し，K. oxytocaのScore Valueを算出した。

IV　考察

一般的な生化学性状を用いた腸内細菌科細菌同定キットではRaoultella属を明確に同定することができず，Klebsiella属や他の腸内細菌科細菌と誤同定されている可能性があり，一般的な生化学的性状を用いた検査での同定は困難とされている^14)～16)。当院においても，MALDI-TOF MS導入以前のRaoultella属の分離例は稀であったが，MALDI-TOF MS導入後より分離例が散見されるようになった。また，Clinical and Laboratory Standards Institute（CLSI）M100-S29より，Enterobacteriaceae内因性耐性の項にRaoultella spp.が追加され，今後MALDI-TOF MSの普及によるRaoultella属の検出数は増加することが予測される。

MALDI BiotyperではScore Value 2.0以上を菌種レベルの一致，1.7以上2.0未満を属レベルの一致，1.7未満を同定不能としている。本検討の生化学的性状検査でK. oxytocaと同定された92株はMALDI Biotyperによる同定で85株がScore Value 2.0以上のRaoultella spp.が候補に挙げられた。しかし，ベストマッチの菌名候補には全株K. oxytocaが挙げられ，生化学的性状検査との一致率は100%を示した。de Jongら¹⁷⁾もMALDI Biotyperにて最も高いScore ValueにK. oxytocaが候補として挙げられた91株は，3-ヒドロキシ安息香酸利用能および16S rRNA遺伝子解析結果より，全株K. oxytocaと同定されたと報告しており，本検討も同様の結果となったことから，ベストマッチの菌名候補にK. oxytocaが挙げられた場合，K. oxytocaと同定できる可能性が高いと考えられる。

本検討の生化学的性状検査でRaoultella spp.と同定された31株は，MALDI BiotyperにてScore Rank 1位から10位までにScore Value 2.0以上のR. ornithinolytica，R. planticola，R. terrigenaが候補として挙げられ，属レベルの同定は可能であることが考えられた。de Alegría Puigら¹⁴⁾もMALDI BiotyperによるRaoultella属の同定は，属レベルで100%（97/97株）同定可能であったと報告している。しかし，Jongら¹⁷⁾の報告ではMALDI Biotyperにて最も高いScore Valueの候補にRaoultella spp.が挙げられた場合，Score Rank 1位のRaoultella spp.と次候補に挙げられたK. oxytocaのScore Value間に10%以上の差がなければ，K. oxytocaと誤同定される可能性があると報告している。本検討ではScore Rank 1位から10位までの全てにRaoultella spp.が挙げられたが，Raoultella spp.と次候補のK. oxytocaとのScore Valueの差は12.3%～28.5%と全株10%以上を満たした。Score Rank 1位にRaoultella spp.が挙げられ，Score Rank 2位から10位までのいずれかにK. oxytocaが挙げられた場合，Score Valueに注意して菌名を推定する必要がある。

MALDI BiotyperによるRaoultella属の菌種レベルの同定能は，de Alegría Puigら¹⁴⁾がR. ornithinolytica，R. planticolaの保有するbla遺伝子のPCR解析およびハウスキーピング遺伝子（rpoB, gyrA, parC）のシーケンス解析結果より，R. ornithinolyticaが100%（63/63株），R. planticolaが56%（17/30株），R. terrigenaが0%（0/4株）同定可能であったと報告している。MALDI Biotyperにてベストマッチに挙げられた菌名候補を本検討の同定菌種とすると，R. ornithinolyticaが100%（4/4株），R. planticolaが16%（4/25），R. terrigenaが0%（0/2）となり，de Alegría Puigらの報告と同様にR. ornithinolyticaは高い同定一致率を示したが，R. planticolaの一致率は低く，R. terrigenaは一致しなかった。また，本検討でRaoultella spp.と同定された31株中27株はベストマッチの菌名候補にR. ornithinolyticaが挙げられたことから，MALDI BiotyperによるRaoultella属の菌種レベルの鑑別は困難であることが考えられる。菌種レベルの鑑別は困難であるが，MALDI Biotyper Compass 4.1におけるRaoultella属の登録リファレンスライブラリ数が，R. ornithinolytica 13株，R. planticola 6株，R. terrigena 5株と，R. ornithinolyticaの登録数が他の2菌種と比較して多く登録されているため，R. ornithinolyticaが菌名候補として多く挙げられた可能性が示唆される。

一方で，本検討のMALDI Biotyperによる同定で，ベストマッチの菌名候補にR. planticolaが挙げられた4株は，生化学的性状検査でもR. planticolaと同定されたが，インドール産生試験は陰性を示した。本検討の生化学的性状でR. planticolaと同定された25株中，インドール産生試験陰性を示したのはこの4株のみであった。Ponce-Alonsoら¹⁶⁾はR. ornithinolyticaおよびR. planticolaの保有するbla遺伝子のPCR解析より，過去にMicro Scan Walkaway（ベックマン・コールター）およびAPI20E（ビオメリュー）にてKlebsiella pneumoniaeと同定された160株からR. planticolaを5株検出しており，MALDI BiotyperにおいてもR. planticolaと同定されたと報告している。Ponce-Alonsoらは検出したR. planticola 5株のインドール産生試験は実施していないが，Micro Scan WalkawayおよびAPI20EにてK. pneumoniaeと同定されたことから，インドール産生試験は陰性であることが推測される。本検討とPonce-Alonsoらの報告より，MALDI BiotyperにてScore Rank上位の菌名候補にR. planticolaが挙げられた場合，インドール産生試験陰性のR. planticolaの可能性が高いことが示唆されるが，正確な同定にはさらなるリファレンスライブラリの充実が望まれる。

最後に，本検討にはいくつかの限界があるので述べる。まず，本検討の炭素同化試験で使用した炭素基質はKlebsiella spp.とRaoultella spp.の同定を目的としているが，非典型的な反応を示す菌株も報告されている^8)～13)。本検討の生化学的性状検査で同定不能となった3株も炭素同化試験で非典型的な反応を示し，菌種同定には至らなかったが，MALDI BiotyperにてRaoultella spp.と同定されたことから，R. ornithinolytica，R. planticola，R. terrigenaのいずれかである可能性が高いことが示唆された。さらに，オルニチン脱炭酸試験陰性を示すR. ornithinolyticaが報告されているが¹⁸⁾，本検討での生化学的性状検査ではオルニチン脱炭酸試験陰性を示すR. ornithinolyticaはインドール産生試験陽性のR. planticolaと誤同定され，本検討の対象菌株にも含まれていた可能性がある。Raoultella属の同定に関しては，16S rRNA遺伝子解析を用いた同定だけでは菌種の同定に至らなかったとの報告があり^6),15),16)，オルニチン脱炭酸試験陰性を示すR. ornithinolyticaのように非典型的な性状を示す菌株の同定は日常検査では困難であると考えられる。そのため，MALDI BiotyperにおけるRaoultella spp.の菌種レベルの同定にはさらなる検討が必要である。

V　結語

MALDI BiotyperではK. oxytocaの同定能は高く，Raoultella属も属レベルの同定は可能であるが，菌種レベルの同定は困難であることが考えられた。Raoultella属の菌種レベルの同定には追加試験を実施する必要がある。

COI開示

本論文に関連し，開示すべきCOI 状態にある企業等はありません。

文献

1) Drancourt M et al.: “Phylogenetic analyses of Klebsiella species delineate Klebsiella and Raoultella gen. nov., with description of Raoultella ornithinolytica comb. nov., Raoultella terrigena comb. nov. and Raoultella planticola comb. nov.,” Int J Syst Evol Microbiol, 2001; 51: 925–932.
2) Shaikh MM, Morgan M: “Sepsis caused by Raoultella terrigena,” J R Soc Med Sh Rep, 2011; 2: 49.
3) Lam PW, Salit IE: “Raoultella planticola bacteremia following consumption of seafood,” Can J Infect Dis Med Microbiol, 2014; 25: 83–84.
4) Seng P et al.: “Emerging role of Raoultella ornithinolytica in human infections: A series of cases and review of the literature,” Int J Infect Dis, 2016; 45: 65–71.
5) Olson DS Jr et al.: “A novel case of Raoultella planticola urinary tract infection,” Int J Infect Dis, 2013; 41: 259–261.
6) 宇野俊介，他：「Raoultella ornithinolyticaによる菌血症を伴った憩室炎を発症した1症例」，日臨微誌，2016; 26: 58–62.
7) 石井大介，他：「食中毒症状と推測される消化器症状を先行したRaoultella planticola菌血症の1例」，日外感染症誌，2018; 15: 195–200.
8) Monnet D, Freney J: “Method for differentiating Klebsiella planticola and Klebsiella terrigena from other Klebsiella species,” J Clin Microbiol, 1994; 32: 1121–1122.
9) Westbrook GL et al.: “Incidence and identification of Klebsiella planticola in clinical isolates with emphasis on newborns,” J Clin Microbiol, 2000; 38: 1495–1497.
10) Stock I et al.: Natural antibiotic susceptibility of Klebsiella pneumoniae, K. oxytoca, K. planticola, K. ornithinolytica and K. terrigena strains,” J Med Microbiol, 2001; 50: 396–406.
11) Kanki M et al.: “Klebsiella pneumoniae produces no histamine: Raoultella planticola and Raoultella ornithinolytica strains are histamine producers,” Appl Environ Microbiol, 2002; 68: 3462–3466.
12) Hansen DS et al.: “Recommended test panel for differentiation of Klebsiella species on the basis of a trilateral interlaboratory evaluation of 18 biochemical tests,” J Clin Microbiol, 2004; 42: 3665–3669.
13) Alves MS et al.: “Identification of clinical isolates of indole-positive and indole-negative Klebsiella spp.,” J Clin Microbiol, 2006; 44: 3640–3646.
14) de Alegría Puig CR et al.: “Comparison between Vitek MS, Bruker Biotyper, Vitek2, and API20E for differentiation of species of the genus Raoultella,” Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 2019; 38: 467–470.
15) Park JS et al.: “Evaluation of three phenotypic identification systems for clinical isolates of Raoultella ornithinolytica,” J Med Microbiol, 2011; 60: 492–499.
16) Ponce-Alonso M et al.: “Comparison of different methods for identification of species of the genus Raoultella: Report of 11 cases of Raoultella causing bacteraemia and literature review,” Clin Microbiol Infect, 2016; 22: 252–257.
17) de Jong E et al.: “Differentiation of Raoultella ornithinolytica/planticola and Klebsiella oxytoca clinical isolates by matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,” Diagn Microbiol Infect Dis, 2013; 75: 431–433.
18) Walckenaer E et al.: “How to identify Raoultella spp. including R. ornithinolytica isolates negative for ornithine decarboxylase? The reliability of the chromosomal bla gene,” J Microbiol Methods, 2008; 75: 405–410.

責任著者(Corresponding author)

J-STAGEへの登録はこちら（無料）