【目的】マウス胚盤胞（受精後5日目，day 5）を脱イオン化BSA(dBSA，0.6%)添加KSOM培地(dBSA培地)で培養すると，胚は遅延着床胚盤胞(DB胚)として少なくともday 9まで生存し，その産仔への発生能はday7まで非常に低いが保持され（産仔率12.5%）day 9では喪失すること，そしてday 9まで内部細胞塊（ICM）細胞数が減少することを我々は示している。本研究では長期培養マウスDB胚の産仔率の向上を目指し，マウス体外培養DB胚の産仔への発生に及ぼす非必須アミノ酸(NEAA)とES細胞の自己増殖に必須であるスレオニン(Thr)の効果を検討した。【方法】ICR系マウス胚盤胞（day 5）をNEAA及びThr(10mM)添加（実験区）あるいは無添加（対照区）dBSA培地でday 9まで培養し，DB胚の細胞数の測定及び胚移植による産仔への発生を検討した。またDB胚の発生におけるThr脱水素酵素(TDH)によるThr代謝の関与について，免疫蛍光染色によるTDHの発現，そしてThr類似体である3-Hydroxynorvaline (3-HNV，30 µM)のDB胚の発生に及ぼす影響を検討した。【結果】実験区のday9 DB胚のICM細胞数は，対照区のday 9 DB胚に比べ有意に高く(P<0.05)，またday 5胚盤胞に匹敵した。実験区のday7 DB胚の産仔率(43.2%)は，対照区day 7 DB胚(12.5%)およびday5胚盤胞(28.8%)に比べ有意に高い値となり(P<0.05)，さらに実験区のday 9 DB胚からも低率(2.4%)ではあるが産仔を得ることができた。TDHはDB胚のICMに局在することが観察され，またDB胚は3-HNVによって退行変性したが，3-HNVと同時にThr (10mM)処理することによってDB胚はday9まで生存した。以上の結果から，NEAA及びThrがマウス体外培養DB胚の生存及び産仔発生能の向上・維持に寄与することが明らかとなった。
