土木学会論文集G(環境)
Online ISSN : 2185-6648
ISSN-L : 2185-6648
環境工学研究論文集 第53巻
ファージディスプレイ法を用いたShewanella algae菌体特異的ペプチドの選抜と菌体回収への適用
井口 晃徳佐々木 波輝長谷川 大地林 真由美原田 秀樹重松 亨
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2016 年 72 巻 7 号 p. III_325-III_332

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抄録

 環境中に存在する特定微生物を回収するための技術の確立を目的に, 12-merのランダム配列のペプチドを提示するファージディスプレイペプチドライブラリを利用したファージディスプレイ法をShewanella algae菌体に供し, 本技術の適用可能性を検証した. S. algae菌体に対してバイオパンニングを2ラウンド行い, 得られた溶出ファージのプラークを形成させて単一のクローンを増やし, Tyramide Signal Amplification法による蛍光シグナル検出にて各種ファージクローンの標的菌体への結合特異性を網羅的に解析した. 溶出ファージのうち標的菌体への結合特異性が高いと判断したクローンを4種選抜し, 4種のファージクローンをそれぞれ使用した磁気ビーズ法による標的菌体の回収を行った. その結果, すべてのファージクローン回収系においてペプチド未提示ファージを使用した回収系より有意に標的菌体を回収することが可能であった. このことより, ファージディスプレイペプチドと磁気ビーズを併用することで特定の微生物を高濃度に回収可能な技術として適用できる可能性が示された.

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© 2016 公益社団法人 土木学会
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