植物におけるtRNAスプライシング装置の細胞内局在

抄録

　真核生物において，イントロンにより分断された核tRNA遺伝子から転写された前駆体tRNAは核内でプロセシングを受け，成熟tRNAは細胞質に輸送される。出芽酵母では，スプライシング装置が核膜の内膜に局在することがすでに分かっている。しかしごく最近になって，酵母のtRNAスプライシング・エンドヌクレアーゼのサブユニットがミトコンドリアの外膜に存在することが示された。
　我々は植物における核tRNAイントロンの分子構造とそのスプライシング機構の解明を進めている：植物ではtRNA^TyrとtRNA^Metをコードする核遺伝子のみがイントロンを保有すること，イントロンが参加した高度に保存された高次構造が植物tRNAエンドヌクレアーゼの基質認識と切断反応に要求されることをすでに本会で報告している。今回，植物tRNAスプライシング装置の細胞内局在を調べるために，エンドヌクレアーゼのサブユニットタンパク質をコードする遺伝子 (AtSen1とAtSen2)とGFPとのキメラ遺伝子を構築し，融合タンパク質の細胞内局在を調べたので報告する。パーティクルガンを用いてこれら遺伝子をタマネギの表皮細胞に導入し，発現したGFP融合タンパク質の局在の蛍光観察を行った。この結果，酵母と同様に，いずれのサブユニットタンパク質ともにミトコンドリア局在が観察された。これと平行して，植物tRNAリガーゼの細胞内局在の解析を進めており，あわせて報告する予定である。