抄録
バラ花弁の粗酵素液を用いた配糖体化反応の解析の結果、バラ花弁のアントシアニン生合成におけるアントシアニジンの配糖体化は先ず5位に、その後3位に起こることが示唆された。そこで、これらを実証するためバラ花弁からのアントシアニジン糖転移酵素遺伝子cDNAの単離及び機能解析を試みた。PSPG boxを基に作成したdegenerate primerを用いたRT-PCR及びRACE法により糖転移酵素 (GT) をコードすると考えられる全長cDNAクローンRhGT1を単離した。大腸菌を用いた組換えタンパク質発現より、組換えRhGT1の酵素活性を解析した結果、Cyanidin (Cy) を基質として反応させた場合、粗酵素液と同様にCyanidin 5-O-glucoside (Cy5G)及びCyanidin 3,5-O-glucoside(Cy3,5G)が反応産物として得られた。一方、Cyanidin 3-O-glucoside (Cy3G) を基質として用いた場合には反応産物は認められなかった。また、ノザン解析の結果、RhGT1転写物の蓄積は粗酵素液でのCyへの5位糖転移活性及び花弁のアントシアニン蓄積と相関が見られた。
以上の結果から、今回単離されたRhGT1にコードされるタンパク質はアントシアニジンの5位、3位の順序で配糖体化することができるこれまでに知られていない新規の配糖体化酵素であることが明らかとなった。
