LRR型受容体キナーゼを介した[³H]PSKのエンドサイトーシス

抄録

ファイトスルフォカイン（PSK）は植物細胞の培養液中に見出された分泌型ペプチドであり，LRR型受容体キナーゼ（PSKR1）を介して細胞の増殖や分化を促進する．我々は野性株由来培養細胞としてはPSKR1の発現レベルが高いニンジンNC細胞を材料として，生細胞における[³H]PSKのPSKR1への結合カイネティクスを解析した．4℃において一定量のNC細胞を種々の濃度の[³H]PSKの存在下でインキュベートし，スキャッチャード解析を行なうと，[³H]PSKの結合定数は4.3 nM，細胞1個あたりの受容体数は，約30,000個と計算された．この[³H]PSKの結合は約2時間で飽和に達するが，過剰量の非ラベルPSK添加により可逆的に解離し，3時間程度で結合はバックグラウンドレベルにまで低下した．一方，[³H]PSKを25℃で2時間結合させた後，過剰量の非ラベルPSKを添加した場合には，結合した[³H]PSKの一部は解離せず細胞に残存した．受容体を介したエンドサイトーシスにより細胞内に取り込まれたと考えられる．この[³H]PSKの内在化は，プロテインキナーゼ阻害剤のK-252aによって阻害されたが，シクロヘキシミドやactinomycin Dではほとんど阻害されなかった．また，PI3-kinase阻害剤であるwortmanninにも阻害効果が見られた．