抄録
RNAi法は効率の高い遺伝子破壊法であるが、致死性や多面発現を示す遺伝子の機能解析のためには組織特異的RNAiベクターの利用がより有効と考えられる。私たちは、アミロース合成酵素をコードするWx遺伝子を標的として、花粉・胚乳で特異的に発現するWxプロモーターを用いたRNAiベクターを設計し(pWRI)、イネにおいてその効果を調べた。この際、イントロンスペーサーのスプライシング効率、トリガー領域とその長さを様々に変更し、同時にテストした。その結果、pWRIは胚乳で特異的にWxの発現を抑制したが、用いたトリガー領域によって機能抑制をうける組織が一部異なる事がわかった。例えば5ユUTRをトリガーとした場合は花粉における抑制がみられず、コード領域を用いた場合には花粉・胚乳双方でWxの発現が抑制された。また、イントロンスペーサーのスプライシング効率を下げる事により、RNAiの効果を量的に減少させることが可能であった。現在、様々な組織特異的プロモーターを用いた汎用性RNAiベクターを開発し研究中である。