抄録
葉緑体包膜は細胞質と葉緑体の間のいわゆる仕切りであり、タンパク質や代謝産物など様々な物質のやりとりの場でもある。低温ストレス下では包膜の構造変化・崩壊が起こり、光合成をはじめとする葉緑体内の様々な代謝活動が著しく低下すると考えられる。我々は、低温から葉緑体膜構造を守る仕組みを明らかにするため、低温誘導される遺伝子を網羅的に探索した。その結果、機能未知遺伝子COR413の産物が葉緑体膜に局在することが示唆されたため、その解析を行った。
本研究ではまず、Cor413-protein A融合タンパク質を過剰発現させたシロイヌナズナのトランスジェニック植物を作出し、葉緑体から精製タンパク質を得た。そして、N末端のアミノ酸シークエンス解析により、Cor413における葉緑体移行シグナルの切断部位を決定した。その結果、このタンパク質は推定される6回の膜貫通ドメインから成り、それ以外の機能ドメインはほとんど存在しないことが明らかになった。さらにprotein A抗体をもちいたウエスタンブロット解析により、Cor413は内包膜に局在することを明らかにした。また、本研究では全長Cor413タンパク質を大腸菌内で発現させて抗体を作製し、タンパク質の生化学的解析およびCor413トランスジェニック植物の耐凍性評価も行ったので併せて報告する。
