抄録
RSGはジベレリン（GA）内生量調節に関与するbZIP型転写活性化因子である。これまでに、RSGの機能はGA内生量に応じた細胞内局在調節によって制御されており、その制御にはRSGのSer-114のリン酸化が重要であることを明らかにしてきた。RSGのSer-114を特異的にリン酸化するキナーゼとしてカルシウム依存性タンパク質キナーゼNtCDPK1が同定された。植物には多数のCDPKイソフォームが存在しており、CDPKが標的とするアミノ酸配列は相同性が高いが、イソフォーム特異的な基質認識機構については不明である。NtCDPK1はRSGと複合体を形成しSer-114をリン酸化するが、NtCDPK2はRSGをリン酸化できない。そこで、NtCDPK1のRSGに対する基質認識機構の解析を行った。NtCDPK1の欠失変異およびアミノ酸置換変異タンパク質を用いたpull-down解析と、シロイヌナズナのCDPKイソフォームの解析から、NtCDPK1のN末端可変領域のArg-10がRSGとの結合に重要であることを明らかにした。Arg-10をアラニンに置換したR10A変異NtCDPK1ではRSGとの結合能は2/3程度まで減少し、さらにRSGのSer-114のリン酸化能は著しく低下した。これらの結果からNtCDPK1のRSGに対する基質認識にはArg-10が重要であることが示唆された。
