抄録
Arthrobacter globiformis T6イソマルトデキストラナーゼについて，大腸菌による効率的な発現系を構築した．シグナルペプチドを欠失させた発現ベクター(Fig. 1)，および25℃という培養温度条件を用い，さらに大腸菌株を検討した結果，当初の段階に比べ発現量は1000倍以上増加し，本酵素の詳細な性質の決定に十分な酵素量を得ることができた(Table 1)．一次構造上，A. globiformis T6イソマルトデキストラナーゼは糖質加水分解酵素のファミリー27に属するα-ガラクトシダーゼおよびα-N-ガラクトサミニダーゼとわずかながら相同性を有することが報告されている．そこで，本実験ではα-ガラクトシダーゼの基質であるメリビオースとイソマルトデキストラナーゼとの反応を調べた．イソマルトデキストラナーゼはメリビオースおよびp-ニトロフェニルα-D-ガラクトシドを加水分解しなかった．イソマルトースおよびマルトースに対する本酵素のKi値はそれぞれ2.3および7.8 mMであったが，メリビオースはほとんど本酵素の活性を阻害しなかった(Fig. 2)．さらに，メリビオースはデキストランを用いた糖転移反応においても良いアクセプターではなく，イソマルトースをアクセプターとして用いた場合の12分の1しか糖転移反応産物が得られなかった(Fig. 3)．本実験の結果，イソマルトデキストラナーゼは加水分解および糖転移において特異的にグルコース残基を認識するものと考えられた．
