抄録
Clostridium thermoamylolyticum株染色体DNAを鋳型としPCRによって2133 bpのopen reading frameをもち，710アミノ酸残基を翻訳産物とするglucoamylase遺伝子(Fig. 1)を取得した．得られた推定glucoamylaseアミノ酸配列はClostridium sp. G0005由来glucoamylaseに対して84%一致し，90%の相同性を示し，Thermoanaerobacterium thermosaccharolyticum由来glucoamylaseに対しては82%一致し，87%の相同性を示した．本遺伝子をpETシステムを用い大腸菌により発現した．形質転換大腸菌の粗抽出液よりNi-NTAカラムクロマトグラフィーを用い，精製倍率10倍，回収率65%，比活性1.8 U/mgの精製glucoamylaseを得た．得られた精製酵素は，分子量77 kDa，maltoseに対するKmは5.4 mM，k0は7.1 s-1，至適pHは4.5，至適温度は65℃であった．本酵素はmaltoseを基質として用いた場合，上記原核微生物由来glucoamylaseと同様の性質を示した．
