抄録
染色体特定領域のDNAライブラリーを構築するためのストラテジーを確立するため，顕微切断およびPCRによりウシY染色体DNAの増幅を行った．リンパ球の分裂中期核板からY染色体を顕微鏡下で切断し，プロテナーゼKで分解後，フェノール/クロロホルムでDNA抽出を行った．抽出したDNAを制限酵素Sau3AIで消化し，EcoRI切断部位を導入した合成リンカー/プライマーに結合した．PCRにより増幅された染色体由来DNA断片はpUC19DNAのEcoRI切断部位にクローニングされた．ポジティブコントロールとして用いたSau3AI切断pUC19DNA断片は，少なくとも0.2 pg以上で増幅されることがわかった．Y染色体由来のDNA断片では，0.15-1.0 kbのスメアーバンドの増幅が認められた．65個のクローン（0.05-1.2 kb）のうちドットハイブリダイゼーションにより2個のクローンが雄特異的であったが，サザンハイブリダイゼーションではY染色体特異性は認められなかった．
