【目的】野生由来マウス（以下，野生マウス）は，実験用マウスに比べて遺伝的多様性が高く，実験用マウスには見られない様々な遺伝的形質を保持している。一方で，これまで実験用マウスで確立されてきた過排卵・体外受精・体外胚培養などの生殖工学技術が利用できない系統が多く，系統の維持・保存が困難なことが野生マウス利用の拡大を妨げている。そこで本研究では，野生マウスの安定的な供給と維持を最終目的と考え，まず野生マウスの体細胞を用いてntESCsの樹立を試みた。【方法】亜種野生マウス系統（Mus musculus castaneus）であるCAST/Ei，CASP/1Ngaと異種野生マウス系統（Mus caroli）であるCarの末梢血から白血球を採取し，大型の白血球（大部分が顆粒球）をドナーとしてB6D2F1（Mus musculus）の徐核卵子に核移植を行った。再構築胚を胚盤胞期まで培養した後，LIF添加の2i法により内部細胞塊を培養し，ntESCsを樹立した。高品質のntESCラインの選抜のため，染色体数の計測を行った。【結果】亜種マウスであるCAST/EiおよびCASP/1Ngaからはそれぞれ14ライン（雌6，雄8）と13ライン（雌8，雄5）のntESCsを樹立した。これまでの染色体数の計測により，CAST/Eiでは雌0/2，雄3/3，CASP/1Ngaでは雌5/6，雄5/5ラインで正常な染色体数が確認された。現在は更に未分化マーカー遺伝子（Oct4，Nanog，Sox2，SSEA1）の発現解析，テラトーマ形成能の検証を行っている。これらの品質評価から選抜した高品質なラインを用いてキメラマウスを作製し，生殖系列への分化を確認する予定である。一方，異種マウスであるCar系統の再構築胚は全て2細胞期で停止したことから，今後は他の異種マウスでも核移植を実施し，発生停止が系統特異的な現象かどうか検証を行う予定である。
