抄録
【目的】SSにおいて、抗M3R抗体の機能を明らかにする。
【方法】
1)M3RのN末端、第1、2、3細胞外ループのペプチドを抗原としたELISAで、SS42例、健常人(HC)42例の抗M3R抗体を測定した。
2)ヒト唾液腺上皮(HSG)細胞株を抗M3R陽性SS、陰性SS、HC由来IgGで12時間共培養し、塩酸セビメリン刺激後のCa2+-influxに対する影響を検討した。
3)M3Rの第2ループで免疫後のM3R-/-マウス由来脾細胞を骨髄腫細胞株と細胞融合し、抗M3Rモノクローナル抗体産生ハイブリドーマを作製した。培養上清から抗M3Rモノクローナル抗体を精製し、HSG細胞株を用いて、Ca2+-influxに対する影響を検討した。
【結果】
1)すべてのエピトープに関して、HCと比較してSSでは抗体価、抗体陽性率ともに有意に高値であった。
2)N末端、第1ループに対する抗体陽性SSのIgGはCa2+-influxを増強したが、第2ループに対する抗体陽性SSのIgGは抑制した。第3ループに対する抗体陽性SS、抗M3R抗体陰性SS、HCのIgGは影響しなかった。
3)異なるCDR3領域を有する2種のハイブリドーマが作製できた。2種の抗M3Rモノクローナル抗体は、共にCa2+-influxを抑制した。
【結論】SSにおいて、第2細胞外ループに対する抗M3R抗体は、唾液分泌低下に関与する可能性が示唆された。