抄録
我々は、これまでに高次アントシアニンを蓄積するリンドウ花弁におけるアントシアニン生合成構造遺伝子の解析を行い、これらの生合成が転写レベルで制御されていることを報告している。アラビドプシスやペチュニアの研究からアントシアニン生合成制御因子として、MYBとbasic Helix-Loop-Helix (bHLH)の転写因子が関与していることが知られている。そこで本研究では、リンドウにおけるそれらの相同遺伝子の単離・解析を行った。花弁cDNAから縮合PCR法をより、GtMYB3とGtbHLH1を単離した。この2つの転写制御因子遺伝子の花弁発達段階における発現は、アントシアニンの蓄積およびその生合成を触媒する酵素遺伝子群の発現様式と一致した。酵母2ハイブリッド解析により、GtMYB3とGtbHLH1は相互作用することが示された。また、一過的発現系を用いてアントシアニン生合成遺伝子のプロモーターに対する活性化能を調査したところ、両遺伝子を共発現した場合においてのみ活性化を示した。さらに、アントシアニンを蓄積しない白花リンドウ品種のGtMYB3遺伝子配列が、トランスポゾン挿入等により機能喪失していることが確認され、GtMYB3がアントシアニン生合成の制御因子である可能性が強く示唆された。現在、GtMYB3遺伝子を抑制したリンドウ形質転換体を作出し、さらなる解析を行っている。