抄録
本研究では、植物における2本鎖RNAを介した遺伝子発現抑制現象の一つとして知られている転写型ジーンサイレンシング(Transcriptional Gene Silencing ; TGS)に着目し、その機構解明を目的とした解析を行った。
我々はこれまで、CaMV 35Sプロモーターの転写制御下でGFPを発現しているNicotiana benthamiana形質転換体に対して、35Sプロモーター配列を組み込んだベクターをゲノムの構成要素として持つキュウリモザイクウイルスを2本鎖RNAの供給源として感染させることで、RNAを介したDNAのメチル化(RNA-directed DNA methylation; RdDM)によりGFP遺伝子のTGSが誘導される系を確立している。今回我々は、長さあるいは部位の異なる35Sプロモーター配列をウイルスベクターに挿入した種々のコンストラクトを用いることで、RdDMの誘導源となる2本鎖RNAの構成がTGSの誘導に及ぼす影響を解析した。その結果、挿入配列の違いは35Sプロモーター配列と相同な2本鎖RNAの蓄積量には影響を与えないものの、35Sプロモーター領域に対するメチル化、およびTGSの誘導効率は挿入配列の長さの制約を受けることが明らかとなった。また、TGS誘導個体におけるメチル化の誘導様式も一様ではなく、動的な変化を伴うことが示された。
