抄録
大型藻類における発生や環境応答の分子レベルでの研究は、遺伝子導入や遺伝子破壊などのreverse geneticsの手法が確立されていないため、緑色植物に比べて遅れている。その克服のため、本研究では紅藻スサビノリにおける一過的遺伝子発現系の開発を行った。その結果、レポーターとして用いるβ-グルクロニダーゼ(GUS)遺伝子のコード領域のコドンをスサビノリのコドン頻度に合わせるように改変したPyGUS遺伝子を作製し、さらにスサビノリ由来のプロモーターを用いることで再現性のある一過的な発現が見られた。これは、CaMV35Sとグリセルアルデヒド3-リン酸デヒドロゲナーゼ(GAPDH)遺伝子のプロモーターをそれぞれPyGUSにつなげた場合、前者ではほとんど発現しなかったのに対して、後者では極めて強い発現が検出されたことによる。次に、RT-PCRで発現量に差があることが確かめられているいくつかの遺伝子のプロモーターをクローン化し、それらの解析を行った。その結果、例えばアクチン(PyACT1)遺伝子のプロモーターでは強い発現が、Na+‐ATPase(PyKPA1)遺伝子のプロモーターでは弱い発現が見られ、RT-PCRの結果と一致した。以上のことから、本研究で開発された一過的遺伝子発現系は、スサビノリ遺伝子のプロモーター解析に有効であると考えられた。現在、その有効性をさらに詳しく検討している。