フリージアに感染する3種のウイルスを同時検出するマルチプレックスRT-PCRの開発

抄録

壊疽症状を呈する八丈島産フリージアからBean yellow mosaic virus (BYMV) ，Freesia mosaic virus (FreMV) ，Freesia sneak virus (FreSV) が高頻度で検出される。このため，高感度かつ迅速に3種のウイルスを同時検出することが可能なマルチプレックスRT-PCRの開発を試みた。3種ウイルス複合感染株の抽出RNAを鋳型とし，FreMV，BYMV，FreSVおよび内部コントロールとして18S rRNAのそれぞれのプライマー濃度を調整することにより，2%アガロースゲル上で4本の明瞭なDNA断片を確認できた。このマルチプレックスRT-PCRと，単一のウイルスを検出するRT-PCRおよび3種ウイルスのELISAによる検出感度の比較を行ったところ，マルチプレックスRT-PCRは単一ウイルスを検出するRT-PCRとほぼ同じ結果を得ることができた。