メチル化解析によるチンパンジーの年齢推定

抄録

霊長類のように寿命の長い種においては，長期の観察記録が得られない場合，対象個体の年齢や集団の年齢構成を推定することができれば，生態の解明に大きく貢献することが期待できる。本研究では，チンパンジーを主な対象として，DNAのメチル化の検出による年齢推定の可能性を検討した。熊本サンクチュアリにおいて飼育され，年齢の判明しているチンパンジー20試料（採取時の年齢2－39才）について，メチル化と年齢の関連を解析した。血液からDNAを抽出し，バイサルフェイト処理した後，ヒトで年齢とメチル化の関連が報告されている遺伝子ELOVL2, CCDC102B, ZNF423の配列にもとづいて設計したメチル化対応プライマーでPCR増幅し，パイロシーケンス法で塩基配列を解析した。配列中のシトシンがメチル化されていれば，バイサルフェイト処理後の配列ではチミンとなる。変化した配列の割合を調べたところ，ELOVL2は年齢と正の有意な相関があった。CCDC102BとZNF423は有意ではないが，年齢と共に減少する傾向がみられた。これらの傾向は，ヒトの既報とも一致していた。8個体の20年間の比較では，メチル化割合の増減に個体差が見られた。相関が低かったZNF423を除いて，ELOVL2とCCDC102Bの2遺伝子の5か所と年齢の相関係数は0.74（p = 0.0318），誤差は5.4年であった。これらの遺伝子を指標として，ある程度の年齢推定が可能と考えられる。今後は，より簡便な解析方法を工夫し，試料数を増やして検証するとともに，霊長類の他種や，フンなど非侵襲的な試料での応用可能性についても検討する。