高速液体クロマトグラフィーによるフグ毒テトロドトキシンの検出と定量に関する基礎的検討

抄録

テトロドトキシン（TTX）は主としてフグ科魚類が有する神経毒である。TTXが原因の食中毒は近年でも多く見られるが，医療施設においてそれら食中毒患者の生体試料中TTXの測定はほとんど実施されていない。そこで，我々は陰イオン交換カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分析を活用して生体試料中のTTXを検出・定量する手法の構築を試みた。我々が構築したHPLC分析系では，保持時間が0.1–0.4 minの分画において，TTXを示す波形が検出された。さらに，クエン酸緩衝液で調製したTTX試料は，1.0–50 μg/mLの濃度範囲で測定が可能であり，測定結果に基づき検量線を作成することができた。続いて，ヒトの血清や尿で調製したTTX試料の検出と定量を試みた。血清試料の場合，除タンパク処理を施してもTTXを正確に検出・定量することは困難であった。一方，尿試料では，TTXは5.0–50 μg/mLの濃度範囲でTTXを示す波形の検出が可能であったが，検量線に当てはめると実際のTTX濃度よりも低い値に算出された。そこで，尿を用いて調製したTTXの測定結果に基づき，改めて作成した検量線に当てはめることで，TTX濃度の算出値を補正することができた。本研究の結果から，我々が構築したHPLC分析系はTTX食中毒患者の尿試料に適応が可能と考えられた。