日本医真菌学会総会プログラム・抄録集
Print ISSN : 0916-4804
第49回 日本医真菌学会総会
セッションID: P-57
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26S rDNA-RFLP 解析を用いた酵母様真菌の簡便な同定法
*遠藤 成朗大澤 宏充三川 隆
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抄録
臨床材料から分離される酵母様真菌の判別を迅速かつ正確に行うために、PCR で増幅した 26S rDNA の restriction fragment length polymorphisms (26S rDNA-RFLP)を用いた同定法を検討した。酵母様真菌(4 属 30 種)の type strain などを用いて、26S rDNA の部分塩基配列(約 600 塩基)を解読し、2-4 本のバンドに切断する7種類の制限酵素を選別した。次に PCR で増幅した 26S rDNA 断片を制限酵素で切断し、相互の RFLP パターンについて BioNumerics Ver.3.51(Applied Maths, Kortrijk, Belgium )を用いてデータベースを作成し、解析して比較検討した。その結果、供試した酵母様真菌 30 種のうち、24 種は制限酵素 Hae III、Hha I、Hpa II および Hinf I を使った RFLP 法で判別可能であった。Candida 属の 2 種(C. famata, C. zeylanoides )および Trichosporon 属の 4 種(T. asahii, T. asteroids, T. inkin, T. ovoides )は各々同一の RFLP パターンを示し同定不能であった。判別不能な菌種については、さらに他の制限酵素による検討や他の遺伝子領域の検討等が必要であると思われる。今回の結果では臨床検査の現場で通常使われている CHROMagar や API オキサノグラムで同定不能なほとんどの臨床分離株に対しても本法を用いて同定可能であることが判明した。
(会員外共同研究者:塚本久美子、細井美往、前田孝一、鈴木真言、雑賀威、長谷川美幸、金山明子、佐藤弓枝、小林いんてつ)
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© 2005 日本医真菌学会
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