抄録
被子植物を除く酸素発生型光合成生物は、構造的に異なる2つのプロトクロロフィリド還元酵素を有し、その一つである暗所作動型プロトクロロフィリド還元酵素（DPOR）は暗所でのクロロフィル合成能を決定づけている。DPORはニトロゲナーゼに似た酸素感受性酵素で、ChlL、ChlN、ChlBの3つのサブユニットから構成される。しかし、酸素発生を伴う光合成生物において酸素感受性のDPORがどのように機能しているかは不明な点が多い。今回、私たちはラン藻 Leptolyngbya boryana のDPORの触媒コンポーネントであるNB-蛋白質の E. coli による機能発現を報告する。 L. boryana のゲノムDNA上において chlN と chlB は異なる遺伝子座にコードされる。そこで、 chlN と chlB を連結したオペロン chlN-chlB が tet- プロモータにより共発現する大量発現プラスミドを構築した。このプラスミドをもつ E. coli の可溶性画分よりStrep-tagを融合したChlNをアフィニティ精製するとChlBが共精製された。これは、 Rhodobacter capsulatus のNB-蛋白質と同様にChlNとChlBもNB-蛋白質を形成していることを示している。精製したラン藻NB-蛋白質は、 L. boryana の粗抽出液のDPORの活性を大きく促進した。このことは、ラン藻のNB-蛋白質が E. coli において活性型として発現したことを示している。
