抄録
高等植物における単一細胞レベルでのプロモータ活性の測定は難しく、活性の細胞間のばらつきや時間変動の解析は大きな困難をともなう。我々はルシフェラーゼ発光イメージングにより、個体内の単一細胞レベルのプロモータ活性を測定することにウキクサ科の植物を用いて成功した。ウキクサ科の植物は無菌培養でき、小さく平坦であることから個体全体イメージングに向いている。我々の開発した測定系では標的プロモータ下流にルシフェラーゼ遺伝子を組み込んだルシフェラーゼレポータをパーティクルボンバーメント法により個体表面の細胞にまばらに導入し、高感度CCDカメラを用いて各導入細胞の生物発光量を測定する。この系では自動連続測定による時系列データの取得や測定時の光条件操作も可能である。本発表では恒常発現や概日発現が予想されるプロモータをLemna属とSpirodela属のウキクサ科植物及びシロイヌナズナに導入し、連続明、連続暗、明暗条件下で測定した結果を報告する。今回開発した、単一細胞レベルでの発現解析技術の新たな活用法についても広く議論する。
