西洋ワサビペルオキシダーゼを触媒とするオレンジIIの退色機構

抄録

西洋ワサビ由来のペルオキシダーゼ (HRP) と過酸化水素 (H₂O₂) 共存下におけるオレンジIIの退色機構を検討した。チオール (RSH) はオレンジIIの退色速度を低下させる。オレンジIIの退色速度が増大し始める時間と, RSHが次第に減少し, 最後になくなってしまう時間が一致した。これらのことから, オレンジIIの退色反応はオレンジIIラジカルの生成を経由して進行することがわかった。次に, HRPの酸化状態の変化を測定することで, HRPの反応時間を求めた。HRPを用いた場合, オレンジIIの退色時間は2～3秒であったが, HRP-H₂O₂系の反応時間は60分であった。HPLCにより反応混合物から1, 2-ナフトキノンを分離した。したがって, これらのことから, HRP-H₂O₂系においては, オレンジIIは水素供与体としてHRP中間体に作用し, オレンジIIラジカルを生成し, さらに, オレンジIIの反応生成物はHRP中間体に水素供与体として作用することが明らかとなった。