Hippo pathway関連因子YAP1およびLATS2がブタ初期胚の発生および組織分化関連遺伝子発現におよぼす影響

抄録

【目的】マウス桑実期胚の外側細胞では核内のTead4-Yap1複合体により栄養膜細胞（TE）分化関連因子の発現が促進される。一方，内側細胞ではHippo pathwayによりLats2がYap1をリン酸化することでTead4-Yap1複合体が形成されず，TE分化が起こらない。ブタ胚では，TEAD4の機能がHippo pathwayによって制御されているかどうか不明である。本研究では，ブタ胚においてYAP1およびLATS2の発現動態を明らかにし，さらにこれら因子の発現抑制を行うことで，ブタ初期胚の発生におけるYAP1およびLATS2の役割について検討した。【方法】ブタ体外成熟卵子および体外受精胚の1-細胞期から胚盤胞（BC）期にかけてのYAP1およびLATS2 mRNA発現量を解析した。1-細胞期胚にYAP1発現抑制用siRNA（YAP1 siRNA）もしくは遺伝子発現抑制効果を有しないControl siRNAを注入した。さらに，siRNAを注入しないUninjected区を設け，胚発生率を調べた。遺伝子発現解析は16-細胞期胚を用いて，YAP1，OCT-4およびSOX2について実施した。LATS2に関しても同様の実験を行った。【結果および考察】YAP1およびLATS2発現量は成熟卵子もしくは1-細胞期胚で高く，その後低下した。YAP1 siRNA注入区においてはBC期への，LATS2 siRNA注入区では桑実期以降への発生が阻害された。YAP1 siRNA注入区においては，OCT-4とSOX2発現量が他の2区と比較して高い値を示した。LATS2 siRNA注入区では，OCT-4発現量がControl siRNA注入区と比較して低い値を示した。SOX2発現量においても，LATS2 siRNA注入区で他の2区と比較して低い値を示した。以上の結果からブタ初期胚の発生にYAP1およびLATS2が必須であること，さらにHippo pathwayが組織分化に関与する可能性が示された。