【背景と目的】我々はこれまでの研究において，ウシ血中マイクロRNA（miRNA）を指標にした早期妊娠診断法の確立のため，人工授精（AI）後21日の妊娠ウシ血漿中で増加するいくつかのmiRNA分子種を見出すとともに，ウシ血中miRNAの定量に適した条件を報告した（昨年度の本大会）。本研究では1）さらに早期における妊娠診断のバイオマーカー候補miRNAの探索，2）AI後21日の妊娠群で高値を示したmiRNA分子種の発情周期における血中含有量の変化を検証した。【材料と方法】妊娠（P），非妊娠（NP）及び発情周期の黒毛和種牛血漿よりmiRNAを抽出した。AI後18日のP及びNPについて，755分子種のウシmiRNAを搭載したマイクロアレイに供し，血中のmiRNA含有量を比較した。また，含有量に違いが認められたmiRNAの中から選出した分子種について，定量的リアルタイムPCR（QPCR）による定量を行った。さらに，AI後21日のPにおいて高値を示すmiRNA分子種について，発情周期における血中含有量の変化をQPCRにより定量した。【結果と考察】マイクロアレイ解析の結果，AI後18日の血漿中には計67分子種のmiRNAが検出された。そのうちPのみで検出されたmiRNAは16，NPのみでは4， P及びNP間で含有量に有意差が見られたものは2分子種であった。QPCRによる検証の結果，含有量に有意差が見られるmiRNA分子種はなかった。一方，AI後21日のPで高値を示したmiRNA分子種の発情周期における血中含有量の変化を検証した結果，いずれのmiRNA分子種についても周期を通してほぼ変動がないことが分かった。AI後21日のP，NP及び発情周期の含有量を比較した結果，いくつかのmiRNA分子種についてPのみで高値を示した。以上の結果より，より早期における妊娠診断のバイオマーカー候補となるmiRNA分子種を見出すことはできなかったが，AI後21日での血中miRNAを指標にした妊娠診断の可能性がより強く示唆された。
