ササユリの大量増殖を目的とし, 無菌播種, 胚培養, 茎頂培養を行った. 無菌播種は発芽率が低く, 培養が確立しなかった. 胚は生長調節物質無添加で子球を形成した. 茎頂組織はNAA 10^-6M添加培地では子球を, BAP 10^-5M添加培地では生長点塊を形成した. 生長点塊はBAP 10^-5M添加培地で継代培養すると増殖し, NAA 10^-6M添加培地に移植することにより多数の子球の形成が観察された. 胚, 茎頂組織および生長点塊から形成された子球のリン片を培養することにより, リン片から新たな子球の分化が認められた. したがって, ササユリの大量増殖法として, 生長点塊を増殖し, そこから子球を形成させる方法と形成された子球のリン片培養を行う方法の2とおりが考えられる.

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オタネニンジン (Panax ginseng C. A. Meyer) カルスからの幼苗への再分化のうち, とくにシュートからの発根条件について統計的手法を用いて考察を行った. Murashige and Skoog (MS) 基本培地中の主要無機塩類のうち, 発根要因を直交配列実験計画法を用いて選び出した後, 主要2要因と発根率の関係を Box-Wilson 法を用いて, 2次多項近似式でシミュレートした. その結果, MS基本培地から, NH₄NO₃を除き, MgSO₄濃度を185mg/lとしたホルモンフリーの培地が完全に発根した植物体を得るのに最適であると推定された. この培地で得られた幼植物体は, 現在鉢上げし, 栽培を試みている.

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育種があまり進んでいないコモチカンランにおいて, Agrobacterium rhizugenes をベクター系とする有用遺伝子導入の可能性を検討した. 菌を接種した葉からは毛状根の可能性がある根が出現し, 無接種区では葉の切断面にカルスのみが発生した. これらの根を除菌後ホルモンフリーのMS培地に移植したところ, 活発に伸長, 分枝する根が得られた. これらの根を再分化培地 (NAA 0.1mg/l+zeatin 5.0mg/l添加MS培地) に移植したところカルスと2次根が発生し, やがて多数の不定芽が出現した. 伸長した不定芽からの発根はIBA 0.1mg/l添加のMS培地に移植することで容易に得られた. 再生した植物体の3分の2は正常な形態を示したが矮化した個体も見られた. 高圧濾紙電気泳動法により再生植物体中のオパインの検出を行ったところ毛状根由来の4個体の再生植物体中3個体の葉からマンノピンが検出され形質転換が確認できた.

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アストラガルス属植物から, Agrobacterium rhizogenes (ATCC 15834) 感染によって毛状根を誘導した. これらの毛状根は, 中性単糖を含む粘質物を生産し, その中性単糖の組成はガラクトース・グルコース・アラビノース・フコース・ラムノース等であった. しかし, 同時に得たカルス・培養根ではとれらの物質の生産は見られなかった. 毛状根の中には, 液体培地中に生産した粘質物を分泌するものがあり, 分泌された中性単糖の種類は減少していた. しかし, これらの中性単糖組成は, 母植物の生産する多糖とも, Agrobacterium rhizogenes の生産するグルカンとも違っていた.

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植物ホルモンを使用しないでニンジンの種子から不定胚形成を行わせることに成功した. ニンジン種子を3種類の次亜塩素酸溶液に浸漬した後, 植物ホルモンを含まない Murashige & Skoog 固形培地 (ショ糖0.1M, 寒天0.8%) 上で培養を行ったところ, 不定胚形成が認められた. 次亜塩素酸処理時間や処理濃度が高まるにつれて種子の発芽率は減少する傾向を示したが, 逆に不定胚形成頻度は上昇する傾向を示した. これらの結果は, ストレスがニンジン不定胚形成能誘導に関与しているという可能性を示唆する新たな証拠であると考えられた。

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ストックの葉片カルスからのプロトプラスト培養と植物体再生について検討した. 子葉切片由来のカルスから, 1.5%メイセラーゼと0.05%のマセロザイムR-10を含む酵素液中でプロトプラストを単離した. プロトプラストは, 修正MS主要塩類, Ringe・Nitsch の微量要素と修正ビタミン溶液に0.2mg/l2,4-D, 1mg/lNAA, 1mg/l BA, 8.1% マンニトール, 1%ぶどう糖, および1%しょ糖を含む培地で培養 (25℃) すると分裂が見られた. 培養10日後のコロニー形成率は, プロトプラスト密度が0.5×105/mlの場合でもっとも高かった. コロニーは, 培養2ヵ月後小カルスに発達し, 1mg/lのBAまたは1mg/l zeatin 添加培地で培養することで不定芽が生じた (9～16%の頻度). これらを20℃に移すと芽が伸長し, 発根は0.1mg/lまたは5mg/lのIBA添加培地で見られた.

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コーヒーノキ (Coffea arabica L.) 培養細胞は, プリンアルカロイドであるカフェインおよびテオブロミンを生産し, その70～90%を培地中に放出した. カフェイン生産量はオーキシンの種類によって影響を受け, 3-indole butyric acid; 2mg/l kinetin; 0.1mg/lを含むMS基本培地 (B2K培地) において最大であり, 全体で43.1mg/flask, 培地中の濃度は131mg/lであった. アルギン酸カルシウムゲルで包括固定化した細胞は4代目まで培養可能であり, この場合は成長培地として用いた2,4-D; 1mg/l, kinetin; 0.1mg/lを含むMS基本培地 (DK培地) で4代目に最も高い生産量を示した.

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ブドウ (品種 Cabernet Sauvignon) の葯を低温処理後, NAA 0.02mg/l, BA 2.0mg/l, sucrose 2%を含む1/2 MS培地で培養した. 継代培養すると, 3か月後に褐変したカルスから, 不定胚が形成された. 不定胚は, 低温処理することによって, 植物体を再生した.

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Mesophyll protoplasts isolated from Lycopersicon glandulosum were cultured in the modified 8E liquid medium. These protoplasts were divided after 5 days of culture. When the fresh liquid medium was added to the culture on the 7th day, the protoplasts continued to divide for 14 days to form colonies. These colonies were transferred to the modified 8E agar medium, then transferred again to MS agar medium containing 1.0mg/l zeatin to induce shoots. The induced shoots finally developed into intact plants on MS hormone-free agar medium.

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Agrobacterium rhizogenes を用いてパックブンからの毛状根誘導を試みた. 得られた毛状根をMS培地中で培養したところ, 17日後に7.6g/lに達し, 21,000U/lのパーオキシダーゼが得られた. パーオキシダーゼ比活性は親植物よりも約5倍高い値を示した.

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ニンジン (Daucus carota L. cv. US春蒔五寸) 実生の頂芽を含む組織片を高濃度 (0.1-0.4M) の塩化ナトリウムを含むMS培地で培養した後, これを含まない Murashige & Skoog 培地に移植・培養することで, 植物ホルモンの添加無しに, 体細胞から不定胚形成を行わせることに成功した.

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Callus tissue was induced from pea leaf-explants on a Murashige-Skoog (MS) medium containing 2, 4-D (0.01-2.0mg/l) and kinetin (0.1-2.0mg/l). Adventitious roots and green spots were formed on the same medium within 40-days of culture. Shoot formation from green spots and subsequent growth were observed when the excised green spots were transferred to a fresh MS medium containing IAA (0.01, 0.04, 0.05mg/l) and kinetin (0.1, 0.5, 0.6mg/l).

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タバコ (Nicotiana tabacum var. Samsun) 葉肉遊離細胞の培養について研究した. その結果, 細胞を1.6×10^-5Mナフタレン酢酸, 4.4・×10^-6Mベンジルアデニン, 0.4Mグルコース, 1%活性炭を含む改変 Kao-8P基本培地で培養すると6～7日目に分裂を開始し, 18日目には10～15細胞集塊を形成することがわかった.

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Protoplasts isolated from suspension cells of D. myoporoides, D. leichhardtii and D. hopwoodii were divided and formed colonies in the modified B5 medium, though there were differences among species with respect to culture conditions required for colony formation. Colonies developed into calli by the two-step culture methods. The calli of D. myoporoides and D. leichhardtii, but not of D. hopwoodii, regenerated shoots which gave rise to plants.

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温室栽培の Dianthus hybrida (品種サクラナデシコ) より茎頂をとり出し, 10%ジメチルスルポキシド+3%グルコース溶液とともに, 0.5℃/minの速度で-40℃まで予備凍結を行った後, 液体窒素下に保存した. 2年後, 温水により急速解凍した茎頂は100%生存しており, 再生したシュートは正常に生育・開花した.

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