組織培養研究

DEVELOPMENT AND CONTRIBUTIONS OF TISSUE CULTURE STUDIES IN JAPAN

Yukiaki Kuroda

1992 年 11 巻 3 号 p. 287-303
発行日: 1992/09/30
公開日: 2012/11/13

DOIhttps://doi.org/10.11418/jtca1981.11.3_287

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In the present review article, the notable and important development and contributions by Japanese scientists in the field of tissue culture are described. The Japanese Tissue Culture Association (JTCA) was founded in 1956 and the 65 meetings of the JTCA have held in various area in Japan. The JTCA has played an important role in the progress of tissue culture studies and in exchanging new informations on research works and practical techniques of tissue culture in Japan. Several committees concerning the cell bank, the biotechnology, the education system, and the edition of the Journal, “Tissue Culture Research Communications”, are effectually assisting the activity of the JTCA. The creative and unique contributions done by Japanese scientists during past 3 decades were described in eight fields of tissue culture, molecular biology, cytogenetics, cell biology, developmental biology, in vitro carcinogenesis, invertebrate cell culture, hereditary diseases and cellular aging. The idea and enthusiasm displayed by these Japanese scientists are still new and fresh. These may stimulate young scientists to proceed their research works in future.

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IN VITRO CULTURE OF EARLY STAGE EMBRYOS FROM LIVESTOCK

Robert M. Petters

1992 年 11 巻 3 号 p. 305-313
発行日: 1992/09/30
公開日: 2012/11/13

DOIhttps://doi.org/10.11418/jtca1981.11.3_305

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Recently, considerable success has been achieved in in vitro culture of embryos from livestock species (pigs, cattle, sheep). In all cases, advances with methods for livestock embryos was made possible by research with laboratory mammals, especially the mouse and hamster. One of the most significant of these contributions was the discovery of methods for overcoming 'in vitro developmental blocks' common to most species. Successful techniques such as oviduct organ culture and oviduct cell cultures were pioneered with laboratory mammals. Modifications of culture media, based on research with mice and hamsters, have resulted in high rates of pig embryo development in vitro. Experiments with bovine and ovine embryos are now beginning to show similar promise. Expectations are high for repeatable, successful culture in vitro of early stage embryos from livestock species using any of a number of currently available methods.

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IN VITRO RECONSTRUCTION OF HUMAN CONJUNCTIVAL TISSUE FROM COLLAGEN AND CULTURED CONJUNCTIVAL CELLS

Ray J.-F. Tsai, Jan-Kan Chen

1992 年 11 巻 3 号 p. 315-318
発行日: 1992/09/30
公開日: 2012/11/13

DOIhttps://doi.org/10.11418/jtca1981.11.3_315

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The growth and development of human conjunctival epithelial cells on threedimensional collagen gels were influenced by the type of fibroblasts dispersed in the collagen gels and by the exposure of confluent epithelial cells to the air-liquid interface. By plating primary human conjunctival epithelial cells on Swiss 3T3-dispersed collagen gels and their subsequent exposure to air-liquid interface upon confluent, a conjunctival equivalent with characteristics of a real conjunctival epithelium was developed.

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IN VITRO DEVELOPMENT OF MOUSE EGGS AFTER NUCLEAR TRANSPLANTATION

Yoko Kato, Yukio Tsunoda

1992 年 11 巻 3 号 p. 319-323
発行日: 1992/09/30
公開日: 2012/11/13

DOIhttps://doi.org/10.11418/jtca1981.11.3_319

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Nuclear transplantation in enucleated oocytes facilitates the development of embryonic and differentiated nuclei in vitro. After nuclear transplantation, reconstituted mouse eggs receiving foreign nuclei even from somatic cells, could develop into blastocysts normally. In mammals, during in vitro culture, this is important since the formation of blastocysts is considered to be the first differentiation event. Though the trigger for blastulation is not very clear, factors affecting the timing of blastulation have been suggested. The nucleo/cytoplasmic ratio is a possible factor and was clearly shown to determine the timing of blastocyst formation in the mouse.
In this paper, the in vitro development of mouse eggs after nuclear transplantation and factors affecting the timing of blastulation are discussed.

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Hybridoma Data Bankにおける情報流通

菅原秀明, 宮崎智, 志村純子

1992 年 11 巻 3 号 p. 325-335
発行日: 1992/09/30
公開日: 2012/11/13

DOIhttps://doi.org/10.11418/jtca1981.11.3_325

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ハイブリドーマデータバンクはクローン細胞株とその免疫活性産物を対象とするデータバンクである.データ項目は、抗原に対する反応性を始めとして、樹立方法や材料の入手方法も含む.現在、米国と日本が中心となってデータを収集し、米国、カナダ、インド、日本の各地域センターでデータを提供している。データ提供は、冊子、問い合わせに対する回答ならびにオンラインデータベースによって行なっている。

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EXTRACELLULAR MATRIX SYSTEM REGULATES CELL GROWTH, TISSUE FORMATION, AND CELLULAR FUNCTIONS

Ryu-Ichiro Hata, Haruki Senoo

1992 年 11 巻 3 号 p. 337-343
発行日: 1992/09/30
公開日: 2012/11/13

DOIhttps://doi.org/10.11418/jtca1981.11.3_337

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In order to investigate the molecular mechanisms involved in tissue formation, we tried to form a three-dimensional tissue from isolated cells in culture and succeeded by adding ascorbic acid 2-phosphate (Asc 2-P), a long-acting vitamin C derivative to the culture medium of human skin fibroblasts. In this review we describe mechanisms of action of Asc 2-P on the growth of the cells and metabolism of the extracellular matrix (ECM), applications of the culture method for the construction of three-dimensional liver tissue and the effects of defective expression of collagen genes on the formation of tissue.

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ヒト胎児由来細胞を用いたin vitro発生毒性試験の開発と応用

仁藤新治

1992 年 11 巻 3 号 p. 345-354
発行日: 1992/09/30
公開日: 2012/11/13

DOIhttps://doi.org/10.11418/jtca1981.11.3_345

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口蓋裂を主徴とする催奇形物質のin vitroスクリーニング法を確立するために、ヒト胎児由来の口蓋間葉細胞(HEPM細胞)を用いた二つの試験方法を考案した。一つは化学物質のHEPM細胞に対する特異的な細胞毒性を指標にして、口蓋裂誘発物質を検出する方法である。二つ目はHEPM細胞の伸展遅延を指標とし、口蓋突起の伸展遅延作用に基づく口蓋裂誘発物質を検出する方法である.これら二つの方法は、催奇形物質に対する感受性および非催奇形物質に対する特異性が高く、またヒトに対するリスク評価への応用も可能なことから、in vitro発生毒性試験法として有用と考えられた.

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“DEVELOPMENTAL EFFICIENCY IN VITRO OF RODENT EMBRYOS CAN BE IMPROVED BY PROTECTING FROM OXIDATIVE STRESS”

Yoichi Noda

1992 年 11 巻 3 号 p. 355-359
発行日: 1992/09/30
公開日: 2012/11/13

DOIhttps://doi.org/10.11418/jtca1981.11.3_355

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Developmental retardation in vitro of mammalian embryos has been known for 30 years over species. The cause (s) of this phenomenon has not been clarified, but recently, evidences were accumulated suggesting that block to development in embryos may be due to oxygen toxicity.
In this article, culture condition-developmental efficiency correlation is described and discussed in terms of oxidative stress.

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神経細胞培養法の確立と応用

堀江秀典

1992 年 11 巻 3 号 p. 361-368
発行日: 1992/09/30
公開日: 2012/11/13

DOIhttps://doi.org/10.11418/jtca1981.11.3_361

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成熟・老化した神経組織の器官培養を確立し、NGF(nerve growth factor)と肝細胞分泌因子に対する応答について単離された神経細胞と比較検討した.末植神経系として脊髄後根神経節(DRG)を、中枢神経系として網膜を用いた、単離された脊髄後根神経節細胞(感覚神経細胞)の神経突起再生に対するNGFの促進作用は生後急激に低下する。しかし、脊髄後根神経節をコラゲナーゼ・トリプシン処理した後にコラーゲンゲル内に包埋し、NGFを作用させると、神経節から胎生期のマウスの神経節からと同様の多数の神経突起の再生が見られた。単離された高純度の神経細胞を神経節のように3次元的に集めNGFを作用させると、同様の強い応答がみられた。3次元的細胞集合により単独では発現しなかったNGFに対する強い応答性を表した。肝細胞から分泌される因子は、神経線維の切断端からの突起再生を促進し、その生存維持効果を示す。NGF、EGF,aFGF、bFGF,IGF-I,llには同様の再生促進作用はみられず、肝臓から分泌されているタンパク質様の因子は新たな神経再生促進因子の可能性が高い.しかし、この因子は単離された神経細胞の再生を促進しない。神経線維を取り巻くシュワン細胞に働きかけて神経再生促進因子を分泌させているのではないかと考えられる.一方、成熟マウスの視神経をあらかじめ切断し一週間後にその網膜を器官培養すると、網膜より神経突起が再生した.この系に肝細胞分泌因子を作用させると無血清下で神経再生が促進された.
ln vivoにおける神経再生に対する薬物作用を解析するためには、単離された神経細胞、神経細胞の集合体、神経細胞を取り巻く細胞系を含む神経組織の器官培養系のそれぞれに対する薬物の作用を段階的に検討していくことが不可欠であり、それらの系から得られた情報をもとにin viVOでの薬物の作用機序を明らかにすることが可能なのではないかと考えられる.

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