凍結および乾燥研究会会誌

直立円筒面へのice liningは,(1)ケークの附着防止,製品の完全な回収に有効であり,内筒面の洗浄工程なしに連続運転を行うことが可能であろう.またice liningは,(2)浅い冷却時を含む凍結時の過冷却防止,乾燥を妨げる難透膜と孤立微細氷晶層形成の排除による乾燥促進,(3)筒面とケークとの乾燥剥離過渡期の短縮,に有効であった.この方式の生産装置実用化には,医薬,食品,微生物,その他各分野の実際過程に即した改良を加える必要があろうが,密閉系連続凍結乾燥を実現する展望をうることができた.

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JSM-840Aに装着できる新しいCRYO-UNITの概要と二,三の応用例を示した.このUNITの使用により鮮明なフリーズ・レプリカ,CRYO-SEM像の観察が可能であるとともに,同一凍結試料のCRYO-SEM,フリーズ・レプリカ像の連続観察が可能であった.

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シートにてラット骨格筋を低温浸透圧脱水(11%〜15%の重量減少)した後,低温保存した.本筋について凍結切片を作製し,光学顕微鏡にて観察し以下の結果を得た.(一部,電顕観察した.)1)瞬間凍結したシート処理筋および無処理筋(対照)は-25℃に一定に保存すれば,少なくとも2ケ月間は形態学的に変化は認められなかった.(光顕レベル)2)筋組織の変性を比較的敏感に反映すると考えられるミトコンドリア酵素に差をみるほどの変性は存在しなかった.3)低温保存でも温度差がある場合,氷の結晶を生じ易い.しかし,シート処理で氷の結晶形成はかなり抑制でき,変性を遅らせることができる.(光顕および電顕レベル)

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固体培地上でカルスの継代培養保存を行っている各種植物細胞について,その長期保存法の確立を目的として凍結処理条件の検討を行った.供試した細胞はDatura innoxia(ケチョウセンアサガオ),Rosa hydrida(バラ)Daucus carota(ニンジン),Nicotiana tabacum(タバコ),Vimca rosea(ニチニチソウ)の5種で,27℃,1週間,暗黒下で培養した後,諸条件の検討に供した.1.冷却速度を1℃/分より低下させても相対的に生存率を高めることはできなかった.2.ハードニング効果を検討した結果4週間のハードニングでは効果はなかった.3.凍害防御剤の組成を検討した結果5% DMSO +10% glucose +0.6M mannitolを含むMS培地で大幅な生存率の上昇がみられた.4.保存温度を検討した結果-135℃保存で-190℃より生存率が高かった.5.回復培養を検討した結果0.2Mマンニトール添加培地での回復培養に最も多く増殖が見られ-135℃保存したものが良く増殖した.6.プロトプラスト化して凍結したケチョウセンアサガオは約4倍,ニチニチソウは14倍とカルス状と比べそれぞれ生存率が著しく増加した.

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