Journal of Mammalian Ova Research

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本研究ではウシ体外受精の全過程で同一の培養液（修正SOF液）を用い，乳酸とグルコースが胚の発育に及ぼす効果を検討した．実験1では体外成熟，受精，発生培地に乳酸の0，3.3，5，10，15 mMを，実験2ではグルコースの0，1.5，3，5 mMを添加した．実験3ではグルコースの1.5 mMを体外受精後それぞれ48，72，96，120時間後に添加した．乳酸の添加区間では胚の分割率に差はみられなかったが，胚盤胞率は3.3 mM添加区で34.8％となり，10，15 mM添加区の18.9，15.7％に比べて有意（p＜0.05）に高かった．グルコースは無添加区が66.9％の分割率となり，1.5，3，5 mM添加区の41.2，46.5，40.3％に比べて有意（p＜0.02）に高かった．また胚盤胞率は無添加区が35.6％となり，3，5 mM添加区の16.7，19.6％に比べて有意（p＜0.02）に高かった．グルコースの1.5 mMを96，120時間後に添加した試験区では胚盤胞率がそれぞれ51.6，50.8％となり，48，72時間後に添加した試験区の32.0，33.3％に比べて有意（p＜0.05）に高かった．

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迅速FISH法によるウシ受精卵の性判別を紹介した．標本はウシ胚盤胞からバイオプシーした約10個の割球から作製した．PCR法により作製したDig-標識プローブ（ウシ雄特異的塩基配列BC1.2）を含むハイブリダイゼーションミックを標本に滴下し，72℃のアルミブロック上で8分間変性した．ただちに，38.5℃で5分間ハイブリダイズした後，72℃に保温したSSPEに5分間静置して高速洗浄を行った．プローブの発光は抗Dig-FITCを用いて行い，蛍光顕微鏡で観察した．FISHの操作が1時間以内に完了し，雄胚と雌胚とが明瞭に判別できることから，迅速FISH法はウシ受精卵の性判別に有効と考えられた．

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