ショウロRhizopogon roseolus は食用の外生菌根菌である．本きのこの人工栽培には，本菌を宿主に感染・増殖させる方法の開発が必要であり，また，優れた特性を具備した菌株系統の選抜が必要とされる．さらに，栽培技術の向上には，実用形質を改変する交雑育種技術が求められるが，その技術開発には，本きのこの生活環に関する基礎的知見が必要とされる．根系無菌育成法で育苗したクロマツ実生にショウロ菌糸体を接種したところ，約2週間で外生菌根を形成し，さらに育苗に伴い著しく外生菌根形成数が増大した菌株系統を選抜した．また，ショウロ菌糸体粉砕液を用いて，自然条件下で宿主クロマツ実生に人工感染させる方法を開発した．プランター育成クロマツ実生にショウロ菌糸体粉砕液を接種したところ，接種後3-4ヶ月後にショウロ子実体が形成した．ショウロ子実体試料を塩酸ギムザで核染色し，顕微鏡観察することでショウロにおける減数分裂や減数分裂後の体細胞分様式を解析し，新規の核行動パターンを明らかにした．本きのこの担子胞子の形成，離脱と離脱後の細胞微細構造を解析したところ，担子胞子離脱様式は非射出型であることを明らかにした．また，担子胞子離脱後に，胞子壁が多層化した．ショウロ担子胞子の発芽率は個体間で変異があり，ベージュ色を呈するショウロ子実体由来の担子胞子の発芽率が最も高かった．また，培地成分を5倍希釈したMMN 寒天培地で良く発芽した．本きのこの担子胞子由来一次菌糸体をクロマツ実生根に接種したところ，外生菌根を形成した．ショウロのクランプコネクション形成検定培地を開発した．本培地に二次菌糸体を接種すると安定してクランブコネクションを形成したが，一次菌糸体では全く形成しなかった．以上の一連の研究でショウロにおける生活環を解明できたことにより，交雑育種技術の基盤を確立することが可能となった．

抄録全体を表示

マツタケの人工栽培おいて短期間で菌糸体を蔓延させるための培地条件の構築が必要不可欠であるが，有利な菌床培養法が確立されておらず，今日までに子実体発生のために必要な菌床の作成に至っていない．本研究では，押麦とバーミキュライトを用いた固体培養系における最適なマツタケ菌糸体培養法を検討した．また，菌糸体細胞壁中のキチン分解産物であるN-アセチルグルコサミン (GlcNAc) 指標とした固体培地中のマツタケ菌糸体バイオマス量の測定法を確立し，培地中の菌糸体バイオマス量を評価した．マツタケ乾燥菌糸体の分解における酵素反応条件としては1％ Yatalaseと0.5 ％ Cellulase “ONOZUKA” RS 溶液が最適であった．続いて，マツタケZ-1, NBRC 30605, No. 115株を供試し，押麦:バーミキュライト＝2:1 (w/w) の培養条件において良好な生育を示した．培養35日目において，それぞれ215.1, 254.0, 266.7 mg biomass/flaskに達した．また，押麦:バーミキュライト＝2:1 (w/w) が最適な培地条件であることが目視およびGlcNAc定量値においても証明された．

抄録全体を表示

シイタケの栽培において，湿度の管理は非常に重要であるが，子実体が生長する際に水分がどのように移動しているのかは不明である．そこで本研究では，原基形成後，菌床または子実体に蛍光色素ローダミンB水溶液を散布または注入することで水分移動の可視化を試みた．菌床表面にローダミンBを散布しても子実体内部への蛍光色素の移動は認められなかった．そこで，子実体原基に直接ローダミンBを注入したところ，生長経過とともに柄の上部にまで移動している様子が観察された．しかし，傘部分にまでは移動していなかった．一方，原基全体にローダミンＢ水溶液を散布した場合，傘の内部にまで取りこまれ，傘に直接触れた水分（空気中の水分）が傘の内部にまで移動することが示唆された.

抄録全体を表示