生物物理化学

1次元目にアガロースゲルを用いたミクロ2次元電気泳動法

大石正道, 平林民雄

1988 年 32 巻 3 号 p. 113-120
発行日: 1988/06/30
公開日: 2009/03/31

DOIhttps://doi.org/10.2198/sbk.32.113

ジャーナルフリー

抄録を表示する抄録を非表示にする

アガロースを1次元目に用いるミクロ2次元電気泳動法を確立した. アガロースを1次元目に用いるとき, これが室温では固まりやすいためミクロ法を行うのは困難であったが, これまでの7M尿素の代わりに1Mチオ尿素5M尿素を用いると, 室温では固まらず, 4℃で固化し, 室温にもどしても固化したままにとどまることが判った. この方法をマクロとミクロで比較してみた結果, ほぼ同程度の分析が出来ることが判り, アガロースを1次元目に用いるミクロ2次元電気泳動法が行えるようになった.

抄録全体を表示

PDF形式でダウンロード (5372K)
軽種馬における Protease inhibitor 型の分類法

横濱道成, 渡邊泰子

1988 年 32 巻 3 号 p. 121-124
発行日: 1988/06/30
公開日: 2009/03/31

DOIhttps://doi.org/10.2198/sbk.32.121

ジャーナルフリー

抄録を表示する抄録を非表示にする

等電点電気泳動法 (IEF) および2次元電気泳動 (2-D) 法による軽種馬のプロテアーゼインヒビター (Pi) 型の分類上の特性を示した. 馬のPi型は異質性が高いので, その型判定に当っては確認方法を確立しておくことが肝要であり, Pi型の分類上の確認方法としては, 2-D法が極めて有効であった.

抄録全体を表示

PDF形式でダウンロード (3591K)
ウサギ腎臓アルカリ性ホスファターゼの多型性とその抗原性について

新井葉子, 小山岩雄, 坂岸良克, 菰田二一

1988 年 32 巻 3 号 p. 125-130
発行日: 1988/06/30
公開日: 2009/03/31

DOIhttps://doi.org/10.2198/sbk.32.125

ジャーナルフリー

抄録を表示する抄録を非表示にする

Characteristics of rabbit kidney cortex and medulla alkaline phosphatases (ALPs) were compared. Although two ALPs had similar enzymatic properties, the mobilities on polyacrylamide gel electrophoresis and sugar moieties of the cortex ALP differed from those of the medulla enzyme. These findings were well consistent with those of human cortex and medulla ALPs.
On the other hand, the antigenicity for ALPs revealed that the cortex ALP reacted to both anti-human liver and anti-human intestinal ALP antibodies, whereas the medulla ALP to not only the anti-human intestinal but also anti-human placental ALP antibodies. Furthermore, rabbit kidney ALPs did not fuse with either anti-rat liver or intestinal ALP antibodies. It is possible to suggest that gene expression of rabbit kidney ALPs are different from the other mammalian kidney ALPs.

抄録全体を表示

PDF形式でダウンロード (2279K)
2次元電気泳動法によるニホンザルのGc蛋白多型

土田修一, 植松一良, 野沢えみ子, 永井淳, 池本卯典

1988 年 32 巻 3 号 p. 131-134
発行日: 1988/06/30
公開日: 2009/03/31

DOIhttps://doi.org/10.2198/sbk.32.131

ジャーナルフリー

抄録を表示する抄録を非表示にする

2次元電気泳動法を用いてニホンザルGc蛋白多型の検出法を検討した. その結果, ニホンザル血清にもヒトの血清蛋白マップのGc蛋白領域に多型性を観察することができた. また, これらの多型を示すスポットは抗ヒトGc血清を用いた免疫固定法でも確認された. すなわち, 検出される2つの表現型は従来の等電点電気泳動法と免疫固定法を組み合わせた方法により分類された表現型と比較したところ, Gc2型およびGc2A1型と判定され, 10例の野生ニホンザルの表現型出現頻度はGc2型は70%, Gc2-2A1型は30%であった. なお, ニホンザルのGc型は2次元電気泳動法のみでも検出可能であり, 従って, 2次元電気泳動法は抗Gc血清を必要とした従来の方法より簡便でしかも経済的な検出法といえよう.

抄録全体を表示

PDF形式でダウンロード (3631K)
Euhadra 属における卵白腺から卵への蛋白質の移行の免疫生化学的確証

2次元電気泳動法と Western blotting 法による蛋白質の解析

浅賀宏昭, 小沢聡子, 江原敦史, 井上勤

1988 年 32 巻 3 号 p. 135-140
発行日: 1988/06/30
公開日: 2009/03/31

DOIhttps://doi.org/10.2198/sbk.32.135

ジャーナルフリー

抄録を表示する抄録を非表示にする

陸生有肺類 Euhadra 属における卵白腺から卵への蛋白質の移行を確証するため, E. peliomphala, E. subnimbosa および E. quaesita の卵白腺と卵の可溶性蛋白質を免疫生化学的に解析した.
E. peliomphala の卵白腺可溶性蛋白質の主要なポリペプチド群 (No. 8, 9ポリペプチド群) を精製し, ウサギに免疫し, 得られた抗血清より卵白腺に対する特異抗体 (anti-AG) を精製した. 次に, anti-AGを用いて, E. peliomphala, E. subnimbosa および E. quaesita の卵白腺と卵の可溶性蛋白質を O'Farrell の2次元電気泳動法と Western blotting 法により解析した. その結果, anti-AGは, 抗原として用いたポリペプチド群に相当する2つのポリペプチド群だけではなく, 他の1つのポリペプチド群 (No. 14ポリペプチド群) とも反応したことが検査した全ての試料について認められた. この結果は, Euhadra 属におけるこれら3つのポリペプチド群が卵白腺から卵へ移行することを強く支持する.

抄録全体を表示

PDF形式でダウンロード (3562K)
電気泳動の新しい支持媒体としてのゼラチン

柴田太, 内山務, 荻田善一

1988 年 32 巻 3 号 p. 141-144
発行日: 1988/06/30
公開日: 2009/03/31

DOIhttps://doi.org/10.2198/sbk.32.141

ジャーナルフリー

抄録を表示する抄録を非表示にする

アガロースゲルにゼラチンを添加することによりDNAの電気泳動による易動度が変化される現象を解析した. 塩基性ゼラチンR (pI 8.4) を添加した場合, DNAは泳動されず, 原点に止まる. 一方, 塩基性ゼラチンRのアミノ基をコハク酸でアシル化した修飾ゼラチンS9 (pI 4.1) の添加では, DNAは泳動分離され, 分子篩効果が加わることによってその移動距離は, DNAの分子量の対数によく反比例する. このことから, 塩基性ゼラチンRのDNA泳動阻止効果はDNA分子とゼラチンのアミノ基との相互作用に基づくと考えられた. この効果はゼラチンRのみで構成されたゲルを用いた場合にも認められた. この場合ゼラチンゲルがフェノール処理により中間層となり, 水層中にDNAが回収される. しかし, 高分子DNAの回収率が低いため, 回収方法をさらに工夫することが必要である. 修飾ゼラチンS9を添加したアガロースゲルを支持媒質として用いた電気泳動では, 分離に分子篩効果が加わることから, 低分子DNAの解析に適している. また, ゼラチンRゲルは, DNAが分離されず原点に止まることから, アガロースゲルからDNAの回収などの精製法の一つに用いられる可能性がある. 以上のことから, ゼラチンならびに, 修飾ゼラチンは, DNA断片の解析ならびに精製に利用できる新しい支持媒質の調製に有用であることを明らかにした.

抄録全体を表示

PDF形式でダウンロード (3373K)
血管壁結合組織コラーゲン蛋白に対するSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動法による分析

井上信一

1988 年 32 巻 3 号 p. 145-152
発行日: 1988/06/30
公開日: 2009/03/31

DOIhttps://doi.org/10.2198/sbk.32.145

ジャーナルフリー

抄録を表示する抄録を非表示にする

The method of fine separation of alpha chains of collagen types I, III, and V by means of delayed reduction of collagen type III with thioglycolic acid (TG) during electrophoresis was investigated. This method is simple and rapid because it does not necessitate an interruption of electrophoresis for the reduction of type III collagen. Furthermore, precise quantitation of alpha chains of collagen type I [alpha₁ (I)] and type III [alpha₁ (III)] can be achieved even with small sample quantities which contain other types of collagen because the mobility of alpha₁ (III) is determined by varying the time TG addition to running buffer for the delayed reduction.

抄録全体を表示

PDF形式でダウンロード (3791K)
2次元電気泳動法によるニホンザルのトランスフェリン蛋白多型

土田修一, 植松一良, 野沢えみ子, 永井淳, 池本卯典

1988 年 32 巻 3 号 p. 153-155
発行日: 1988/06/30
公開日: 2009/03/31

DOIhttps://doi.org/10.2198/sbk.32.153

ジャーナルフリー

PDF形式でダウンロード (2111K)