生物物理化学
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29 巻, 3 号
選択された号の論文の6件中1~6を表示しています
  • 中林 治夫, 柳沢 徹, 永森 静志, 渡辺 礼次郎, 亀田 治男
    1985 年 29 巻 3 号 p. 179-184
    発行日: 1985/05/31
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    Continuous gradient polyacrylamide microgel electrophoresis is one of the methods for examining a minute amount of sample. We applied this method for the investigation of proteins of cerebrospinal fluid (CSF) in normal subjects and patients suffering from neurological diseases. We could analyse the proteins of unconcentrated CSF in amount of under 1μl. The amount of albumin was calculated directly from the area under the albumin peak on the densitogram with the standard line of albumin. Twelve bands of proteins were obvious and they always appeared at the same positions on the gel in all normal CSF samples. Proteins more anodic than albumin were clearly analysed in this method as well as those more cathodic than albumin. We examined the relationship between various neurological diseases and the amount of the protein which was located at the most anodic side (band 1).
  • 荒川 正明, 尾形 研二, 伊藤 喜久, 櫻林 郁之介, 河合 忠
    1985 年 29 巻 3 号 p. 185-190
    発行日: 1985/05/31
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    A new method for the discrimination of epitopes of monoclonal antibodies by biotin-avidin enzymeimmunoassay was developed. The principle of this method was as follows: Several monoclonal antibodies reacted with one antigen were defined. After incubation of one non-biotinylated monoclonal antibody in the antigen coated polystylene plate, biotinylated another monoclonal antibody was added and incubated. After washing, peroxidase conjugated avidin was reacted. Finally, peroxidase activity was assayed using O-phenylenediamine as substrate containing H2O2. As the results, it was probable that the non-biotinylated monoclonal antibody was different from the biotinylated monoclonal antibody when peroxidase activity could be detected. On the other hand, it was suggested that the non-biotinylated antibody had a same epitope of the biotinylated antibody, or the antigenic determinants which were recognized with both monoclonal antibodies were very closed when peroxidase activity couldn't be detected.
    This method was very easy and safe to handle comparing with the method using radioactive compounds. The biotinylated antibodies, furthermore, were stable over one year when they were stocked at 4°C.
  • 黒川 達郎, 下川 浩, 東原 潤一郎, 久永 幸生, 中野 仁雄
    1985 年 29 巻 3 号 p. 191-195
    発行日: 1985/05/31
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    正常妊娠における尿中蛋白組成の変化を分析するために今回の研究を施行した.
    15例の正常妊婦の妊娠中の尿中蛋白組成の変化をSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動法 (以下SDS-PAGEと略) により分析した.
    その結果, 妊娠初期には1本あるいは2本 (分子量71×103, 94×103) の帯が認められ, 妊娠経過に伴い帯の数が増加し, 妊娠後期には7本の帯が認められた. しかし産褥1ヶ月では, 帯の数は再び2本になり, 妊娠初期と同じ像を呈した.
    今回の結果より, 妊娠中の尿中蛋白の分析にSDS-PAGEが有用であることがわかった.
  • 森山 隆則, 細川 博道, 信岡 学
    1985 年 29 巻 3 号 p. 197-203
    発行日: 1985/05/31
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    Biochemical properties of LDH linked immunoglobulin complexes found in sera of three cases (IgG-κ, IgA-κ, IgG-κ, λ) were studied. The complexes were completely dissociated by gel filtration at pH 3.0 and the dissociated LDH with normal molecular size showed a normal zymogram. When the dissociated immunoglobulins were incubated with each of the LDH isozymes (LDH1-5), the two IgG type immunoglobulins recombined with all isozymes, but the IgA type immnoglobulin showed limited combination with only LDH2, 3, 4 fractions, indicating a difference in binding specificity between IgG and IgA.
    Subclass specificity tested in two IgG types was not detected by Protein A affinity chromatography. The binding site of IgG was confirmed to exist on the Fab portion by the method of papain digestion. 5'-AMP-Sepharose 4 B affinity chromatography revealed different affinity between LDH linked IgG (broad pattern) and LDH linked IgA (extra band). This finding suggests the presence of conformational heterogeneity.
  • 金丸 育恵, 牧野 義彰, 紺野 邦夫
    1985 年 29 巻 3 号 p. 205-210
    発行日: 1985/05/31
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    immobiline gel 等電点電気泳動によるヒト Transferrin の microheterogeneity を検討した. 精製したヒト血清TFをpH5.0~6.0の範囲で immobiline gel による等電点電気泳動すると異なる等電点を持つ4つの分画に分離, 泳動された. 各々の等電点は, 酸性側からA: pI5.15~5.19, B: pI5.26~5.30, C: pI5.37~5.42, D: pI5.50~5.54であった. また, 6M Urea 電気泳動からA-D分画は, 全て diferric TFであることが確認された. 精製TFのA-D分画の割合は, A:B:C:D=1:3:5:1であった. 細胞表面に存在するTF receptor へのA-D分画の結合は, 阻害実験によって調べると著明な差は見られなかった. 正常ヒト血清を直接等電点電気泳動し, 抗血清中で immunofixation を行なうとA~D分画に相当する沈降線が得られたので, 正常ヒト血清中にも同じ鉄含量で等電点を異にするTF分画が存在する事が示唆された.
  • 片山 和信
    1985 年 29 巻 3 号 p. 211-215
    発行日: 1985/05/31
    公開日: 2009/03/31
    ジャーナル フリー
    マウス赤血球からスーパーオキシドジスムターゼ (SOD) を精製しその性質を調べた. 赤血球を有機溶媒処理後, ゲル濾過とイオン交換クロマトグラフィーで精製したSODはポリアクリルアミドゲル電気泳動で2本の主泳動帯と3本の副泳動帯に分離されたが, それぞれの泳動帯は活性染色と一致した. このSOD活性帯は全てKCNの阻害を受けたためCu,Zn-SODと考えた. SDS電気泳動とゲルクロマトグラフィーから, このCu,Zn-SODは32,000の分子量を有し, 16,000のサブユニットからなる2量体と推定した. 紫外部吸収曲線とPAS染色の結果からチロジン, トリプトファン, 糖含量が非常に少ないことが示唆された. 凍結乾燥処理により易動度の遅いSODの泳動帯が出現した. これは凝集したSODの可能性がある. マウス赤血球Cu,Zn-SODはすでに報告されているホ乳動物のそれときわめて類似した構造と化学的性質を持っていた.
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