Matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) is one of the soft ionization methods in mass spectrometry (MS). Its analyte compatibility with a matrix can improve analyte-selective ionization efficiency and control the fragmentation properties of the product ions. 2,5-dihydroxybenzoic acid (DHB) is a versatile matrix that can be used for various molecular species. Although DHB is commonly used as the matrix of first choice for MALDI MS of glycans, many attempts to optimize DHB for glycan analysis using additives have also been reported. This mini-review will present additives of the DHB-based matrix that promote direct analysis of carbohydrates and glycoconjugates by MALDI MS.

Protein C-mannosylation is a unique type of protein glycosylation in which a single α-mannose is attached to the indole C2 of tryptophan (Trp) through a C–C bond. The Trp-x-x-Trp (WxxW) sequences, whose first Trp residue may be C-mannosylated, constitute the consensus motifs of this rare glycosylation modification. Dpy-19 was recognized as a gene encoding C-mannosyltransferase in Caenorhabditis elegans. DPY19L1 and DPY19L3 were later confirmed as mammalian C-mannosyltransferases. The consensus motif can be found in the thrombospondin type 1 repeat and cytokine receptor type I families as well as in many other proteins, and recent studies suggest critical roles of C-mannosylation in the folding, sorting, and/or secretion of the substrate proteins. We successfully synthesized C-mannosylated Trp-containing Trp-Ser-Pro-Trp (WSPW) peptides. As a result of using these peptides in our investigations, we proposed that C-mannosylation may have biological functions in addition to contributing to the folding and stability of the substrate proteins. In this mini-review, we discuss the biological roles of C-mannosylation in physiology and pathology as based on our recent findings.

マトリックス支援レーザー脱離イオン化（MALDI）法は質量分析（MS）におけるソフトイオン化法の一つであり、マトリックスとの相性により分析種選択的なイオン化効率の向上や生成した分子イオンの開裂（フラグメンテーション）特性のコントロールが可能となる。糖鎖のMALDI MSには広範な分子種に利用できる2,5-ジヒドロキシ安息香酸（DHB）が第一選択肢のマトリックスとして広く利用されているが、添加剤により糖鎖構造解析に最適化する試みも多数報告されている。本ミニレビューでは添加DHBを用いた糖鎖および複合糖質の直接解析について紹介する。

タンパク質C-マンノシル化は単一のα-マンノースがC–C結合を介してトリプトファン（Trp）残基のインドール環のC2原子に結合する点においてユニークなタンパク質の糖修飾である。Trp-x-x-Trp（WxxW）配列の最初のTrp残基がC-マンノシル化され得ることが知られており、この稀なグリコシル化におけるコンセンサス配列となっている。Dpy-19が線虫のC-マンノース転移酵素をコードする遺伝子として報告されており、後にDPY19L1とDPY19L3が哺乳類におけるC-マンノース転移酵素として同定された。C-マンノシル化のコンセンサス配列はトロンボスポンジンタイプ1リピート及びサイトカインレセプター1スーパーファミリーに多く含まれるが、他のタンパク質でも見られる。C-マンノシル化の生理機能は完全には解明されていないが、最近の研究により、C-マンノシル化がタンパク質のフォールディングや輸送、分泌に重要であることが示唆された。我々は最初のTrpがC-マンノシル化されたTrp-Ser-Pro-Trp（WSPW）ペプチドの化学合成に成功し、このペプチドを用いた研究により、C-マンノシル化がタンパク質のフォールディングや安定化に加えて別の生物学的機能を有することを示唆してきた。このミニレビューでは、我々の最近の知見を基にC-マンノシル化の生物学的機能について議論する。