日本食品微生物学会雑誌
Online ISSN : 1882-5982
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30 巻, 3 号
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総説
原著
  • グリコーゲン添加エタノール沈殿法によるノロウイルスの濃縮分離法
    船越 久司
    原稿種別: 原著
    2013 年 30 巻 3 号 p. 156-159
    発行日: 2013/09/30
    公開日: 2014/01/29
    DOIhttps://doi.org/10.5803/jsfm.30.156
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    In this study, we developed a novel method to concentrate Norovirus (NoV) in environmental swabs by ethanol precipitation with glycogen to investigate the route of transmission in outbreaks of NoV infection. The recovery rates of the samples were significantly higher than with previous methods, the mean recovery rates were almost 100%, and the lowest detectable copy number was 1.5×102 in 15 ml of sample. The precipitate was obtained by low-speed centrifugation and could be used as a sample for the following steps: RNA extraction and virus detection using RT-PCR, without removing glycogen. The novel method was able to concentrate NoV regardless of the genotype and amount of virus in the samples, and all procedures could be finished within about one hour. The data suggest that the novel method is useful for the detection of NoV from environmental materials.
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短報
  • Duplex SYBR Green real-time PCR法による食中毒起因菌16遺伝子の一斉迅速検査法の開発
    飯田 奈都子, 福島 博, 廣井 みどり, 八木 美弥, 神田 隆, 村上 賢, 杉山 寛治
    原稿種別: 短報
    2013 年 30 巻 3 号 p. 160-164
    発行日: 2013/09/30
    公開日: 2014/01/29
    DOIhttps://doi.org/10.5803/jsfm.30.160
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    細菌性食中毒検査の迅速化・省力化のため，duplex real-time PCR法を用いた食中毒起因菌のより実践的な一斉スクリーニング法を考案した．本法は，食中毒患者の糞便検体から抽出されたDNAを対象とし，Duplex SYBR Green real-time PCRの8反応系を同時に行い，発生頻度の高い食中毒起因菌の16遺伝子を一斉に検索する．菌種の同定は，融解曲線分析のT m値との比較より，判定することが可能である．実際の食中毒事例の患者糞便検体に本法を導入したところ，培養法と同等の成績を約3～4時間で得ることができた．本法は，検査の効率化のみならず，食中毒事件へのより迅速な行政対応を可能にし, 健康危機管理の一端を担う方法として活用が期待される．
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