日本畜産学会報

対立遺伝子数2のシングルマーカーによる父方半きょだい家系での量的形質遺伝子座探索

富樫研治, 吉臭努, 韮沢圭二郎, 三橋忠由, 山本直幸, 佐々木修

1998 年 69 巻 10 号 p. 903-910
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.903

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後代検定下の乳牛集団で,大家系を得やすい検定済み種雄牛をベースにして3世代にわたり対立遺伝子数2のMとmをもつDNAシングルマーカーの分離から量的形質遺伝子座(QTL)を探索する方法を検討した.すなわち,DNAマーカーは,検定済み種雄牛,その半きょうだい息牛,その孫娘牛と3世代にわたり得られるとした.一方,そのDNAマーカーと関連がある乳生産性記録は孫娘牛で得られるとした.孫娘牛の乳生産性記録に対するモデルは,量的形質遺伝子座における対立遺伝子期待数を共変量とした回帰部分とそのQTLに連関していない父牛相加的遺伝効果の和を遺伝的効果としたサイアーモデルとした.従来のドーターデザイン,グランドドーターデザインにおけるマーカーは,前者では父牛とその娘牛,後者では祖父牛とその息牛と別々に得られると定義されているが,ここではマーカーが3世代にわたって得られることより,本デザインを組み合わせデザインとした.従来のグランドドーターデザインでは,その息牛であるサイアーのシングルマーカーがMmの場合は,グランドサイアー由来QTL遺伝子を推定できなかったが,組み合わせデザインではMmのサイァーからその娘牛のマーカーをとることによって孫娘牛記録にしめるQTL対立遺伝子数の推定を可能にした.サイアーのQTLとマーカーとの連鎖相の推定も前世代のマーカーをとることによって改良されると考えられた.父方半きょうだい家系においてQTLが存在するか否かという回帰係数が0か否かの検定尺度として第1種の過誤の確率をもって組み合わせ(サイアーのマーカー型:Mm, Mm, mm),ドーター(Mm),グランドドーターデザイン(MM, mm)を比較した.その結果,組み合わせデザインの第1種の過誤の確率が最も少ない傾向を示した.また,グランドサイアーが1頭でも組換え率5,10%,サイアー当たり娘牛数50頭全相加的遺伝分散にしあるQTL分散が0.2の場合は,QTL検定の第1種の過誤の確率は5%を下回った.検定済み種雄牛の家系を利用した本法は,統計的手法が容易であり,過誤の確率が低い染色体部位近辺は他のマーカーや候補遺伝子探索の糸口を与えることより,本法は乳牛集団全体を対象としたQTLマッピングの予備的手法として意義あるものと考えられた.

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ニワトり始原生殖細胞のウズラ胚への導入と生殖腺への移住

小野珠乙, 横井亮平, 前田誠司, 西田隆雄, 青山裕彦

1998 年 69 巻 10 号 p. 911-915
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.911

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ニワトリ胚の始原生殖細胞(PGCs)を含む血液をウズラ胚血流への導入し,ニワトリPGCsを特異的に染色するモノクローナル抗体2C9およびウズラPGCsを特異的に染色するモノクローナル抗体QCR1を用いて,二重免疫組織染色により,それぞれのPGCsを識別した.Hamburger and Hamiltonのステージ14-16のウズラ胚からは0.5-2μlの血液を抜き取ることができたが,ステージ29における生殖腺中のウズラのPGCsを有意に減少させるには至らなかった.抜血後,ステージ13-14のニワトリPGCsを0.5-3μl導入したウズラ胚はステージ29において,生殖腺にニワトリPGCsが定住し,全体の5.6%を占めた.

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ウズラ卵管におけるステロイド11β-水酸基脱水素酵素活性の部位による違い

森誠, 酒井仙吉

1998 年 69 巻 10 号 p. 916-922
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.916

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一般にステロイドホルモンは,特異的なレセプターと結合することによって作用を発現する.しかしアルドステロンのレセプターはグルココルチコイドとの結合が強く,またグルココルチコイドの血中濃度はアルドステロンよりも高いので,このままではアルドステロンのレセプターはグルココルチコイドに占められてしまう.これを防ぐためにアルドステロンの標的細胞にはステロイド11β-水酸基脱水素酵素(11β-HSD)が備わっている.この酵素によって11β位の水酸基が酸化されたグルココルチコイドは,もはやアルドステロンのレセプターとは結合できなくなる.鳥類の卵管は,排卵後の卵子の周囲に卵黄膜外層,卵白,卵殻膜,卵殻を付着する部位であり,外分泌腺として塩濃度の調節がおこなわれているはずであるが,アルドステロンの作用についてはこれまでまったく調べられていない.そこで本研究ではウズラ卵管の各部位からミクロソーム分画を調製し,NADP⁺の存在下で[³H]コルチコステロンとインキュベーションすることによって,11β-HSD活性の部位による違いを測定した.11β-HSD活性はミクロソームのタンパクあたりの11-デヒドロコルチコステロンの変換量として表した.その結果,他の部位と比べて,卵管膨大部および卵殻腺部に本酵素の強い活性が認められ,これらの部位がアルドステロンの標的である可能性が示された.

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マウス卵子および卵管,子宮液の脂肪酸組成

王公金, 辻井弘忠, MAM Yahia KHANDOKER

1998 年 69 巻 10 号 p. 923-928
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.923

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Eleven main fatty acids in oocytes and embryos of mice were identified by gas chromatography and compared with those in oviduct fluid, uterine fluid and blood serum. In oocytes and 1-cell embryos, arachidonic acid content was very high, 30.4 and 60.5%, respectively. Myristic acid concentrations in 2-, 8-cell embryos and blastocysts were higher (26.0 to 36.1%) than those in other cell stages (1.8 to 11.2%). Palmitic and oleic acid in oocytes and embryos were significantly high among different cell stages (P⟨0.05), but the proportions clearly varied from stage to stage. Besides the above-mentioned fatty acids, the other fatty acid proportions also showed significant differences (P⟨0.05) among different cell stages. Palmitic, oleic, palmitoleic, docosahexenoic, arachidic and lignoceric acid contents in mouse embryos were basically similar to those in oviduct and uterine fluid at each corresponding cell stage (P⟩0.05).

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嫌気性ルーメン真菌Piromyces sp. AO 12の¹⁴C標識遊走子を利用したルーメンプロトゾアの遊走子捕食活性推定

小林泰男, 中川俊樹, 小野田昭雄, 脇田正彰, 星野貞夫

1998 年 69 巻 10 号 p. 929-932
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.929

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Rumen fungus Piromyces sp. AO 12 was grown with ¹⁴C-oleic acid to yield radio-labelled zoospores. By incubating the labelled zoospores with mixed rumen protozoa, predatory activity of protozoa on fungal zoospores was estimated. The radioactive carbon was incorporated into total fungal cells at an efficiency of 9.5%, 9.8% of which was distributed in the zoospores. A labelled single zoospore was calculated to record 0.080cpm. When the labelled zoospores were incubated with mixed protozoal suspension (1:30 in cell number ratio), significant radioactivity was transferred to the protozoal cells after 1-3 hour, but little with 0 hour incubation. This demonstrates that fungal zoospores are associated with protozoal cells, or possibly ingested by protozoa. A frequency of this association was calculated to be a single zoospore/52 cells of protozoa/hour.

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肥育中の黒毛和種から採取した皮下脂肪トリアシルグリセロールの分子種組成

伊藤良, 有原圭三

1998 年 69 巻 10 号 p. 933-936
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.933

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The compositions of molecular species of triacylglycerol of subcutaneous fat biopsies taken from fattening spaiers and steers of Japanese Black were determined. There were no differences in the molecular species concentrations of triacylglycerols between spaiers and steers at 13 or 30 months of age, however the molecular species compositions of triacylglycerols of the 13 months of age were significantly different from those of the 30 months of age. The major molecular species of subcutaneous triacylglycerol at 13 months of age were [dipalmitoyl (PP)-stearoyl (S)-glycerol ([PPS])], dipalmitoyl (PP)-oreoyl (O)-glycerol (PPO) and POO, and at 30 months of age were PPO and POO. POO had the highest concentration in these molecular species. POO, POL and SOL concentrations of subcutaneous triacylglycerols at 30 months of age were higher than those of 13 months of age.

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ブタの筋肉内トリアシルグリセロールの分子種組成

伊藤良, 有原圭三

1998 年 69 巻 10 号 p. 937-940
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.937

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The compositions of fatty acid and molecular sgecies in intramuscular triacylglycerols of three kinds of porcine muscles from three way crossing (Landrace×Large White×Duroc) pigs were determined by gas chromatography. There were no differences in the fatty acid and molecular species compositions of triacylglycerols among three kinds of muscles. The major fatty acids of intramuscular triacylglycerols were palmitic acid (C16:0), stearic acid (C8:0) and oleic acid (C18:1) where C18:1 had the highest concentration. The major molecular species of intramuscular triacylglycerols were dipalmitoyl (PP)-oleoyl (O)-glycerol (PPO) and P-stearoyl (S)-O-glycerol (PSO), POO and P-O-linoleoyl (L)-glycerol (POL). POO had the highest concentration in these molecular species.

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ウズラの視覚器および視蓋の孵化後発達に関する形態計測

山田未知, 後藤麻美, 杉田昭栄

1998 年 69 巻 10 号 p. 941-949
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.941

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ウズラ視覚系の孵化後の成長に伴う発達を調べるため,眼球,脳および視蓋の形態計測を行った.さらに網膜とその主要な情報受容部位である視蓋の組織学的検討も併せて行った.動物は0日齢10羽,5日齢10羽,10日齢10羽,15日齢10羽,20日齢11羽,30日齢11羽,40日齢7羽,54日齢8羽の日本ウズラ(Coturnix Japonica)計77羽を用いた.眼球と脳の重量は孵化後0～54日齢までほぼ同様の増加推移を示した.視蓋重量もほぼ脳重量と同じ推移を示したが,脳に対する視蓋の割合は孵化後から日齢を経るごとに減少し,特に0～10日齢までの減少は顕著であった.一方,30日齢以降はその割合が約13.5%と安定していた.眼球の強膜骨,レンズの重量増加は0～10日齢において緩やかであったが,孵化後15日齢からの増加は顕著であった.しかし,レンズは30日齢以降,ほぼ横ばいの推移を示した.組織観察では,網膜は0日齢においてすでに成鳥と同様な層構造が確認でき,組織学的にはウズラにおける網膜は孵化時点において基本構造は形成されていることが分かった.しかし,各層は,孵化時において完成されているのではなく,孵化後各層を構成する細胞が成長に伴い密になるとともに,全体として各層ともその厚さが薄くなり,孵化後も組織が変化していることが分かった.特に20～30日齢にかけての内顆粒層,内網状層の厚さの薄化は著しいものであった.視蓋層は0より54日齢まで日齢を経るごとにその厚さを増加させていた.層区分についてみると,視蓋の各層は,0～20日齢においては中心白層以下の深層の層区分が不明瞭であったが,30日齢以降は一般的な分類どおり1～6層に区分され,さらに浅線維および灰白層は20日齢から明瞭にa～jの亜層に分けられた.これらの結果よりウズラ視覚系を構成する各器官の完成,また視蓋,網膜の組織の完成は30日齢ころと考えられた.

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めん羊ルーメン微生物によるメタンおよび揮発性脂肪酸生成に及ぼす硝酸塩の影響

中村豊, 美留町潤一, 吉田條二

1998 年 69 巻 10 号 p. 950-954
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.950

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To study the effects of nitrate on methane and volatile fatty acids (VFA) productions by sheep rumen microorganisms, in vitro experiments were carried out. Rumen contents obtained from fistulated sheep fed hay and concentrates were strained through two layers of gauze. The resulting rumen fluid was incubated for 24 hours with or without nitrate in the presence of substrates, ground timothy hay, ground corn grain and soybean meal. The total gas productions by rumen microorganisms were inhibited with addition of nitrate. The percentage of methane in the total gas was 5-14% during 24 hours incubation without nitrate, and the methane production was suppressed with the increase of added nitrate. However, after 24 hours incubation, addition of nitrate did not decrease the total VFA production nor alter its molar proportion.

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ルーメンプロトゾアが子牛の血漿ガストリン濃度に及ぼす影響

西口靖彦, 須藤まどか, 竹中昭雄, 佐藤博

1998 年 69 巻 10 号 p. 955-959
発行日: 1998/10/25
公開日: 2008/03/10

DOIhttps://doi.org/10.2508/chikusan.69.955

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Effect of ruminal protozoa in calves was examined with two trials. In Trial 1, six ruminal cannulated Holstein calves were used. The plasma gastrin level of calves during pre-inoculated period was high, and showed little change following feeding. Inoculation of ruminal protozoa decreased the plasma gastrin level, especially 8 (P⟨0.01) and 10 (P⟨0.05) hour after feeding. Distinct gastrin peak at 1 hour after feeding was observed only in post-inoculated period. In Trial 2, seven newborn Holstein calves were used. At 5 weeks of age, 4 calves were inoculated ruminal protozoa, and the rest 3 calves were kept unfaunated until 24 weeks of age. The average plasma gastrin level of faunated calves was lower than of unfaunated ones. The two trials indicated that ruminal protozoa affect calf plasma gastrin level and secretion pattern.

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